ssmuБюллетень сибирской медициныBulletin of Siberian Medicine1682-03631819-3684Siberian State Medical University, the Ministry of Healthcare of the Russian Federation10.20538/1682-0363-2018-3-13-21ssmu-1279Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL PAPERSСкрининг белков-биомаркеров рака легкого с помощью мультиплексной электрохимической сенсорной системы на основе аптамеровScreening of lung cancer biomarker-proteins with a multiplex electrochemical sensor system based on aptamersГлазыринЮ. Е.GlazyrinYu. E.

Глазырин Юрий Евгеньевич - научный сотрудник,  КрасГМУ им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого, ФИЦ КНЦ СО РАН.

660036, Красноярск, Академгородок, 50; 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1

Glazyrin Yury E. - Researcher, KrasSMU named after Prof. V.F. Voino-Yasenetsky, FRC of the KSC SB RAS.

ШабалинаА. В.ShabalinaA. V.

Шабалина Анастасия Валерьевна - кандидат химических наук, старший научный сотрудник.

634050, Томск, пл. Новособорная, 1

Shabalina Anastasia V., PhD, Researcher.

1, Novosobornaya Sq., Tomsk, 634014

РыжинскаяК. А.RyginskayaK. A.

Рыжинская Ксения Александровна, студент.

634050, Томск, пл. Новособорная, 1

Ryginskaya Ksenia A. – Student.

1, Novosobornaya Sq., Tomsk, 634014

ЗамайС. С.ZamayS. S.

Замай Сергей Сергеевич - кандидат физико-математических наук, старший научный сотрудник.

660036, Красноярск, Академгородок, 50

Zamay Sergey S. - PhD, Researcher.

50, Akademgorodok,  Krasnoyarsk, 660036

КоловскийВ. А.KolovskiV. A.

Коловский Василий Андреевич - инженер.

660036, Красноярск, Академгородок, 50

Kolovski Vasilii A., Researcher.

1, Novosobornaya Sq., Tomsk, 634014

СветличныйВ. А.SvetlichnyiV. A.

Светличный Валерий Анатольевич - кандидат физико-математических наук, зав.  лабораторией перспективных материалов и технологий.

634050, Томск, пл. Новособорная, 1

Svetlichnyi Valerii A. - PhD, Head of Laboratory of Advanced Materials and Technology.

1, Novosobornaya Sq., Tomsk, 634014

ЛапинИ. Н.LapinI. N.

Лапин Иван Николаевич - научный сотрудник.

634050, Томск, пл. Новособорная, 1

Lapin Ivan N., Researcher.

1, Novosobornaya Sq., Tomsk, 634014

ЗамайГ. С.ZamayG. S.

Замай Галина Сергеевна - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, КрасГМУ им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого, ФИЦ КНЦ СО РАН.

660036, Красноярск, Академгородок, 50; 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1

Zamay Galina S. - PhD, Researcher, FRC of the KSC SB RAS, KrasSMU named after Prof. V.F. Voino-Yasenetsky.

50, Akademgorodok,  Krasnoyarsk, 660036; 1, PartizanZheleznyakStr., Krasnoyarsk, 660022

КоловскаяО. С.KolovskayaO. S.

Коловская Ольга Сергеевна - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, КрасГМУ им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого, ФИЦ КНЦ СО РАН.

660036, Красноярск, Академгородок, 50; 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1

Kolovskaya Olga S. - PhD, Researcher, FRC of the KSC SB RAS; KrasSMU named after Prof. V.F. Voino-Yasenetsky.

50, Akademgorodok,  Krasnoyarsk, 660036; 1, Partizan Zheleznyak Str., Krasnoyarsk, 660022

ЗамайТ. Н.ZamayT. N.

Замай Татьяна Николаевна - доктор биологических наук, профессор, ведущий научный сотрудник.

660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1

Zamay Tatiana N. - DBSc, Professor, Leading Researcher.

1, Partizan Zheleznyak Str., Krasnoyarsk, 660022

tzamay@yandex.ruПацЮ. С.PacYu. S.

Пац Юрий Сергеевич - кандидат медицинских наук, профессор.

660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1

Pac Yurii S. - PhD, Professor.

1, Partizan Zheleznyak Str., Krasnoyarsk, 660022

КичкайлоА. С.KichkailoA. S.

Кичкайло Анна Сергеевна - доктор биологических наук,  руководитель лаборатории биомолекулярных и медицинских технологий, КрасГМУ им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого, ФИЦ КНЦ СО РАН.

660036, Красноярск, Академгородок, 50; 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1

Kichkailo Anna S. - DBSc, Head of Laboratory BoMeT, KrasSMU named after Prof. V.F. Voino-Yasenetsky; FIC of the KSC of the SB RAS.

50, Akademgorodok,  Krasnoyarsk, 660036; 1, Partizan Zheleznyak Str., Krasnoyarsk, 660022 

Федеральный исследовательский центр (ФИЦ) КНЦ СО РАН; Красноярский государственный медицинский университет (КрасГМУ) им. проф. В.Ф. Войно-ЯсенецкогоРоссияFederal Research Center (FRC) of the KSC of the SB RAS; Krasnoyarsk State Medical University (KrasSMU) named after Prof. V.F. Voino-YasenetskyRussian FederationСибирский физико-технический институт Томского государственного университета (СФТИ ТГУ)РоссияSiberian Phisical-Technical Institute (SPhTI) of Tomsk State University (TSU)Russian FederationФедеральный исследовательский центр (ФИЦ) КНЦ СО РАНРоссияFederal Research Center (FRC) of the KSC of the SB RASRussian FederationКрасноярский государственный медицинский университет (КрасГМУ) им. проф. В.Ф. Войно-ЯсенецкогоРоссияFederal Research Center (FRC) of the KSC of the SB RAS; Krasnoyarsk State Medical University (KrasSMU) named after Prof. V.F. Voino-YasenetskyRussian FederationКрасноярский государственный медицинский университет (КрасГМУ) им. проф. В.Ф. Войно-ЯсенецкогоРоссияKrasnoyarsk State Medical University (KrasSMU) named after Prof. V.F. Voino-YasenetskyRussian Federation2018290920181731321Copyright © Глазырин Ю.Е., Шабалина А.В., Рыжинская К.А., Замай С.С., Коловский В.А., Светличный В.А., Лапин И.Н., Замай Г.С., Коловская О.С., Замай Т.Н., Пац Ю.С., Кичкайло А.С., 20182018Глазырин Ю.Е., Шабалина А.В., Рыжинская К.А., Замай С.С., Коловский В.А., Светличный В.А., Лапин И.Н., Замай Г.С., Коловская О.С., Замай Т.Н., Пац Ю.С., Кичкайло А.С.Glazyrin Y.E., Shabalina A.V., Ryginskaya K.A., Zamay S.S., Kolovski V.A., Svetlichnyi V.A., Lapin I.N., Zamay G.S., Kolovskaya O.S., Zamay T.N., Pac Y.S., Kichkailo A.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://bulletin.ssmu.ru/jour/article/view/1279Цель

Цель. Разработка и демонстрация метода одновременного определения нескольких биомаркеров рака легкого в плазме крови больных с помощью мультиплексной электрохимической сенсорной системы, основанной на ДНК-аптамерах. ДНК-аптамеры представляют собой новый класс синтетических аффинных реагентов, получаемых с помощью процедуры селекции in vitro или in vivo методом систематической эволюции лигандов экспоненциальным обогащением (SELEX).

Материалы и методы

Материалы и методы. Для создания мультиплексного электрохимического биочипа использовалось несколько аптамеров, полученных ранее путем селекции к послеоперационным тканям рака легкого. Идентификацию белков-мишеней аптамеров проводили с помощью модифицированного метода аффинного обогащения (AptaBID). В качестве молекулярных мишеней для использованного набора аптамеров к раку легкого были определены виментин, дефензин, легкая цепь миозина, тубулин альфа 1-B, нейтрофил эластаза и фактор удлинения 1 A1. Определение наличия этих белков-биомаркеров в плазме крови проводили с помощью электрохимической детекции. В качестве отклика системы на присутствие белков-онкомаркеров в плазме крови выступала разница между величинами пиков на квадратно-волновой вольтамперограмме до и после нанесения плазмы на электроды с предварительно иммобилизированными на их поверхности аптамерами. Для контрольного сравнения использовалась плазма крови здоровых добровольцев.

Результаты

Результаты. Показано, что в плазме крови всех исследованных больных раком легкого повышено содержание белков-биомаркеров, связывающихся с аптамерами на поверхностях электродов. Повышенное содержание этих белков в плазме крови больных предполагает их химиорезистентность и высокую степень инвазивности и метастазирования опухолей.

The aim of this work is the development and demonstration of the method of simultaneous detection of several biomarkers of lung cancer in the blood plasma of patients using a multiplex electrochemical testing system based on DNA aptamers. DNA aptamers are a new class of synthetic affinity probes obtained by in vitro or in vivo selection procedure by the systematic evolution of ligands by exponential enrichment (SELEX).

Materials and methods

Materials and methods. A set of aptamers obtained previously by selection for postoperative lung cancer tissue was used to create a multiplex electrochemical biochip. Identification of aptamer target proteins was performed using a modified affinity enrichment method (AptaBID). Molecular targets for the used set of aptamers to lung cancer were defined as vimentin, defensin, a light chain of myosin, tubulin alpha 1-B, neutrophil elastase and A1 elongation factor 1.

Measurements of the presence of these biomarker proteins in blood plasma were carried out using electrochemical detection. The difference between peak heights before and after plasma deposition on the electrodes modified by aptamers was considered as a response of the system to the presence of protein onco-markers in blood plasma. Blood plasma of healthy volunteers was used as control.

Results

Results. Research showed that in the blood plasma of all the patients with lung cancer the content of biomarker proteins that bind to aptamers on electrode surfaces was increased. The increased content of these proteins in the blood plasma of patients suggests the presence of invasiveness and metastasis of tumors and their chemo-resistance.

аптамерыбиомаркерырак легкогомультиплексная электрохимическая сенсорная системаaptamersbiomarkerslung cancermultiplex electrochemical sensory systemReferencesMumbarkar P., Raste A.S., Ghadge M.S. Significance of tumor markers in lung cancer. Indian Journal of Clinical Biochemistry. 2006; 21 (1): 173–176. DOI: 10.1007/BF02913090.Mumbarkar P., Raste A.S., Ghadge M.S. Significance of tumor markers in lung cancer. Indian Journal of Clinical Biochemistry. 2006; 21 (1): 173–176. DOI: 10.1007/BF02913090.Wang R., Wang G., Zhang N., Li X., Liu Y. Clinical evaluation and cost-effectiveness analysis of serum tumor Markers in Lung Cancer. BioMed Research International. 2013; 2013: 1–7. DOI.org/10.1155/2013/195692.Wang R., Wang G., Zhang N., Li X., Liu Y. Clinical evaluation and cost-effectiveness analysis of serum tumor Markers in Lung Cancer. BioMed Research International. 2013; 2013: 1–7. DOI.org/10.1155/2013/195692.Mizuguchi S., Nishiyama N., Iwata T., Nishida T., Izumi N., Tsukioka T., Inoue K., Kameyama M., Suehiro S. Cytokeratin 19 fragment as predictive factors for recurrence in patients with stage I non-small cell lung cancer. Ann. Thorac. Surg. 2007; 83 (1): 216–221.Mizuguchi S., Nishiyama N., Iwata T., Nishida T., Izumi N., Tsukioka T., Inoue K., Kameyama M., Suehiro S. Cytokeratin 19 fragment as predictive factors for recurrence in patients with stage I non-small cell lung cancer. Ann. Thorac. Surg. 2007; 83 (1): 216–221.Bastawisy A.E., Elazzouny M., Mohammed G., Awadallah A., Behiry E. Serum cytokeratin 19 fragment in advanced lung cancer: could we eventually have a serum tumor marker? Ecancer. 2014; 8 (394): 1–9. DOI.org/10.3332/ecancer.2014.394.Bastawisy A.E., Elazzouny M., Mohammed G., Awadallah A., Behiry E. Serum cytokeratin 19 fragment in advanced lung cancer: could we eventually have a serum tumor marker? Ecancer. 2014; 8 (394): 1–9. DOI.org/10.3332/ecancer.2014.394.Zamay G.S., Kolovskaya O.S., Zamay T.N., Glazyrin Yu.E., Krat A.V., Zubkova O.A., Spivak E.A., Wehbe M.B., Gargaun A.A., Muharemagic D.A., Komarova M.A., Grigorieva V.L., Savchenko A.A., Modestov A.A., Berezovski M.V., Zamay A.S. Aptamers selected to postoperative lung adenocarcinoma detect circulating tumor cells in human blood. Molecular Тherapy. 2015; 23 (9): 1486–1496. DOI: 10.1038/mt.2015.108.Zamay G.S., Kolovskaya O.S., Zamay T.N., Glazyrin Yu.E., Krat A.V., Zubkova O.A., Spivak E.A., Wehbe M.B., Gargaun A.A., Muharemagic D.A., Komarova M.A., Grigorieva V.L., Savchenko A.A., Modestov A.A., Berezovski M.V., Zamay A.S. Aptamers selected to postoperative lung adenocarcinoma detect circulating tumor cells in human blood. Molecular Тherapy. 2015; 23 (9): 1486–1496. DOI: 10.1038/mt.2015.108.Zamay G.S., Zamay T.N., Kolovskii V.A., Shabanov A.V., Glazyrin Yu.E., Veprintsev D.V., Krat A.V., Zamay S.S., Kolovskaya O.S., Gargaun A., Sokolov A.E., Modes- tov A.A., Artyukhov I.P., Chesnokov N.V., Petrova M.M., Berezovski M.V., Zamay A.S. Electrochemical aptasensor for lung cancer-related protein detection in crude blood plasma samples. Scientific Reports. 2016; 6: 343–350. DOI: 10.1038/srep34350.Zamay G.S., Zamay T.N., Kolovskii V.A., Shabanov A.V., Glazyrin Yu.E., Veprintsev D.V., Krat A.V., Zamay S.S., Kolovskaya O.S., Gargaun A., Sokolov A.E., Modes- tov A.A., Artyukhov I.P., Chesnokov N.V., Petrova M.M., Berezovski M.V., Zamay A.S. Electrochemical aptasensor for lung cancer-related protein detection in crude blood plasma samples. Scientific Reports. 2016; 6: 343–350. DOI: 10.1038/srep34350.Berezovski M.V., Lechmann V., Musheev M.U., Mak T.W., Krylov S.N. Aptamer-facilitated biomarker discovery (AptaBID). Journal of American Chemical Society. 2008; 130 (28): 9137–9143. DOI: 10.1021/ja801951p.Berezovski M.V., Lechmann V., Musheev M.U., Mak T.W., Krylov S.N. Aptamer-facilitated biomarker discovery (AptaBID). Journal of American Chemical Society. 2008; 130 (28): 9137–9143. DOI: 10.1021/ja801951p.Василенко И.В., Кондратюк Р.Б., Колесникова И.А., Кудряшов А.Экспрессия виментина в опухолевых клетках раков различных органов и разного гистологического типа. Патология. 2014; 1 (30): 845–867.Василенко И.В., Кондратюк Р.Б., Колесникова И.А., Кудряшов А.Экспрессия виментина в опухолевых клетках раков различных органов и разного гистологического типа. Патология. 2014; 1 (30): 845–867.Hou J.-M., Krebs M., Ward T., Sloane R., Priest L., Hughes A., Clack G., Ranson M., Blackhall F., Dive C. Circulating tumor cells as a window on metastasis biology in lung cancer. The American Journal of Pathology. 2011; 178 (3): 989–996. DOI: 10.1016/j.ajpath.2010.12.003.Hou J.-M., Krebs M., Ward T., Sloane R., Priest L., Hughes A., Clack G., Ranson M., Blackhall F., Dive C. Circulating tumor cells as a window on metastasis biology in lung cancer. The American Journal of Pathology. 2011; 178 (3): 989–996. DOI: 10.1016/j.ajpath.2010.12.003.Satelli A., Li S. Vimentin as a potential molecular target in cancer therapy or Vimentin, an overview and its potential as a molecular target for cancer therapy. Cell Mol. Life Sci. 2011; 68 (18): 3033–3046. DOI: 10.1007/s00018-011-0735-1.Satelli A., Li S. Vimentin as a potential molecular target in cancer therapy or Vimentin, an overview and its potential as a molecular target for cancer therapy. Cell Mol. Life Sci. 2011; 68 (18): 3033–3046. DOI: 10.1007/s00018-011-0735-1.Al-Saad S., Al-Shibli K., Donnem T., Persson M., Bremnes R.M., Busund L.-T. The prognostic impact of NF-kB p105, vimentin, E-cadherin and Par6 expression in epithelial and stromal compartment in non-small-cell lung cancer. British Journal of Cancer. 2008; 99 (9): 1476–1483. DOI: 10.1038/sj.bjc.6604713.Al-Saad S., Al-Shibli K., Donnem T., Persson M., Bremnes R.M., Busund L.-T. The prognostic impact of NF-kB p105, vimentin, E-cadherin and Par6 expression in epithelial and stromal compartment in non-small-cell lung cancer. British Journal of Cancer. 2008; 99 (9): 1476–1483. DOI: 10.1038/sj.bjc.6604713.Paterlini-Brechot P., Benali N.L. Circulating tumor cells (CTC) detection: Clinical impact and future directions. Cancer Letters. 2007; 253 (2): 180–204. https://doi.org/10.1016/j.canlet.2006.12.014.Paterlini-Brechot P., Benali N.L. Circulating tumor cells (CTC) detection: Clinical impact and future directions. Cancer Letters. 2007; 253 (2): 180–204. https://doi.org/10.1016/j.canlet.2006.12.014.Arimura Y., Ashitani J.-I., Yanagi S., Tokojima M., Abe K., Mukae H., Nakazato M. Elevated serum-defensins concentrations in patients with lung cancer. Anticancer Research. 2004; 24: 4051–4058.Arimura Y., Ashitani J.-I., Yanagi S., Tokojima M., Abe K., Mukae H., Nakazato M. Elevated serum-defensins concentrations in patients with lung cancer. Anticancer Research. 2004; 24: 4051–4058.Tomlinson V.A., Newbery H.J., Bergmann J.H., Boyd J., Scott D., Wray N.R., Sellar G.C., Gabra H., Graham A., Williams A.R., Abbott C.M. Expression of eEF1A2 is associated with clear cell histology in ovarian carcinomas: overexpression of the gene is not dependent on modifications at the EEF1A2 locus. British J. Cancer. 2007; 96 (10): 1613–1620. DOI: 10.1038/sj.bjc.6603748.Tomlinson V.A., Newbery H.J., Bergmann J.H., Boyd J., Scott D., Wray N.R., Sellar G.C., Gabra H., Graham A., Williams A.R., Abbott C.M. Expression of eEF1A2 is associated with clear cell histology in ovarian carcinomas: overexpression of the gene is not dependent on modifications at the EEF1A2 locus. British J. Cancer. 2007; 96 (10): 1613–1620. DOI: 10.1038/sj.bjc.6603748.Pinke D.E., Kalloger E., Francetic T., Huntsman D.G., Lee J.M. The prognostic significance of elongation factor eEF1A2 in ovarian cancer. Gynecol. Oncol. 2008; 108 (3): 561–568. DOI: 10.1016/j.ygyno.2007.11.019.Pinke D.E., Kalloger E., Francetic T., Huntsman D.G., Lee J.M. The prognostic significance of elongation factor eEF1A2 in ovarian cancer. Gynecol. Oncol. 2008; 108 (3): 561–568. DOI: 10.1016/j.ygyno.2007.11.019.Cao H., Zhu Q., Huang J., Li B., Zhang S., Yao W., Zhang Y. Regulation and functional role of eEF1A2 in pancreatic carcinoma. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2009; 380 (1): 11–16. DOI: 10.1016/j.bbrc.2008.12.171.Cao H., Zhu Q., Huang J., Li B., Zhang S., Yao W., Zhang Y. Regulation and functional role of eEF1A2 in pancreatic carcinoma. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2009; 380 (1): 11–16. DOI: 10.1016/j.bbrc.2008.12.171.Li Z., Qi C.F., Shin D.M., Zingone A., Newbery H.J., Kovalchuk A.L., Abbott C.M., Morse H.C. Eef1a2 promotes cell growth, inhibits apoptosis and activates JAK/ STAT and AKT signaling in mouse plasmacytomas. PLoS One. 2010; 5 (5): e10755. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0010755.Li Z., Qi C.F., Shin D.M., Zingone A., Newbery H.J., Kovalchuk A.L., Abbott C.M., Morse H.C. Eef1a2 promotes cell growth, inhibits apoptosis and activates JAK/ STAT and AKT signaling in mouse plasmacytomas. PLoS One. 2010; 5 (5): e10755. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0010755.Blanch A., Robinson F., Watson I.R., Cheng L. S., Irwin M.S. Eukaryotic translation elongation factor 1-Alpha 1 inhibits p53 and p73 dependent apoptosis and chemotherapy sensitivity. Plos One. 2013; 8 (6): e66436. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0066436.Blanch A., Robinson F., Watson I.R., Cheng L. S., Irwin M.S. Eukaryotic translation elongation factor 1-Alpha 1 inhibits p53 and p73 dependent apoptosis and chemotherapy sensitivity. Plos One. 2013; 8 (6): e66436. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0066436.Kenzo K., Kaneko K., Satoh K., Masamune A., Satoh A., Shimosegawa T. Myosin light chain kinase inhibitors can block invasion and adhesion of human pancreatic cancer cell lines. Pancreas. 2002; 24 (1): 34–41.Kenzo K., Kaneko K., Satoh K., Masamune A., Satoh A., Shimosegawa T. Myosin light chain kinase inhibitors can block invasion and adhesion of human pancreatic cancer cell lines. Pancreas. 2002; 24 (1): 34–41.Joglekar A.P., Bloom K.S., Salmon E.D. Mechanisms of force generation by end-on kinetochore-microtubule attachments. Current Opinion in Cell Biology. 2010; 22 (1): 57–67. https://doi.org/10.1016/j.ceb.2009.12.010.Joglekar A.P., Bloom K.S., Salmon E.D. Mechanisms of force generation by end-on kinetochore-microtubule attachments. Current Opinion in Cell Biology. 2010; 22 (1): 57–67. https://doi.org/10.1016/j.ceb.2009.12.010.Martello L.A., Verdier-Pinard P., Shen H.-J., He L., Torres K., Orr G. A., Horwitz S. B. Elevated levels of microtubule destabilizing factors in a taxol-resistant/dependent a549 cell line with an α-tubulin mutation. Cancer Res. March. 2003; 63: 1207.Martello L.A., Verdier-Pinard P., Shen H.-J., He L., Torres K., Orr G. A., Horwitz S. B. Elevated levels of microtubule destabilizing factors in a taxol-resistant/dependent a549 cell line with an α-tubulin mutation. Cancer Res. March. 2003; 63: 1207.Lee W.L., Downey G.P. Leukocyte elastase: physiological functions and role in acute lung injury. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2001; 164 (5): 896–904. DOI: 10.1164/ajrccm.164.5.2103040.Lee W.L., Downey G.P. Leukocyte elastase: physiological functions and role in acute lung injury. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2001; 164 (5): 896–904. DOI: 10.1164/ajrccm.164.5.2103040.Houghton A.M., Rzymkiewicz D.M., Ji H., Gregory A.D., Egea E.E., Metz H.E. Neutrophil elastase-mediated degradation of IRS-1 accelerates lung tumor growth. Nat. Med. 2010; 16 (2): 219–223. DOI: 10.1038/nm.2084.Houghton A.M., Rzymkiewicz D.M., Ji H., Gregory A.D., Egea E.E., Metz H.E. Neutrophil elastase-mediated degradation of IRS-1 accelerates lung tumor growth. Nat. Med. 2010; 16 (2): 219–223. DOI: 10.1038/nm.2084.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.