ssmuБюллетень сибирской медициныBulletin of Siberian Medicine1682-03631819-3684Siberian State Medical University, the Ministry of Healthcare of the Russian Federation10.20538/1682-0363-2019-1-266-276ssmu-2193Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL PAPERSФенотип и функции дендритных клеток человека, генерированных из субпопуляций моноцитов CD14+, оппозитных по экспрессии CD16Phenotype and functions of human dendritic cells derived from CD14+ monocyte subsets opposed to CD16 expressionhttps://orcid.org/0000-0003-2346-6279ЧерныхЕ. Р.ChernykhE. R.

Черных Елена Рэмовна, доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАН, заведующая лабораторией клеточной иммунотерапии

630099, Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14

Chernykh Elena R., DM, Рrofessor, Corresponding Member of the Russian Academy of Sciences, Head of the Laboratory of Cellular Immunotherapy

14, Yadrintsevskaya Str., Novosibirsk, 630099

ct_lab@mail.ruТыриноваТ. В.TyrinovaT. V.

Тыринова Тамара Викторовна, кандидат биологических наук, научный сотрудник, лаборатория клеточной иммунотерапии

630099, Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14

Tyrinova Tamara V., PhD, Researcher, Laboratory of Cellular Immunotherapy

14, Yadrintsevskaya Str., Novosibirsk, 630099

https://orcid.org/0000-0003-3169-8643ЛеплинаО. Ю.LeplinaO. Yu.

Леплина Ольга Юрьевна, доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник, лаборатория клеточной иммунотерапии

630099, Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14

Leplina Olga Yu., DM, Leading Researcher, Laboratory of Cellular Immunotherapy

14, Yadrintsevskaya Str., Novosibirsk, 630099

https://orcid.org/0000-0002-2366-1667ТихоноваМ. А.TikhonovaM. A.

Тихонова Марина Александровна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, лаборатория клеточной иммунотерапии

630099, Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14

Tikhonova Marina A., PhD, Superior Researcher, Laboratory of Cellular Immunotherapy

14, Yadrintsevskaya Str., Novosibirsk, 630099

https://orcid.org/0000-0002-7080-777XКурочкинаЮ. Д.KurochkinaYu. D.

Курочкина Юлия Дмитриевна, аспирант, лаборатория клеточной иммунотерапии

630099, Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14

Kurochkina Yuliya D., Postgraduate Student, Laboratory of Cellular Immunotherapy

14, Yadrintsevskaya Str., Novosibirsk, 630099

https://orcid.org/0000-0002-1044-3564ОлейникЕ. А.OleynikE. A.

Олейник Екатерина Александровна, аспирант, лаборатория клеточной иммунотерапии

630099, Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14

Oleynik Ekaterina A., Postgraduate Student, Laboratory of Cellular Immunotherapy

14, Yadrintsevskaya Str., Novosibirsk, 630099

https://orcid.org/0000-0003-3290-7910СахноЛ. В.SakhnoL. V.

Сахно Людмила Васильевна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, лаборатория клеточной иммунотерапии

630099, Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14

Sakhno Ludmila V., PhD, Senior Researcher, Laboratory of Cellular Immunotherapy

14, Yadrintsevskaya Str., Novosibirsk, 630099

https://orcid.org/0000-0001-6895-938XОстанинА. А.OstaninA. A.

Останин Александр Анатольевич, доктор медицинских наук, профессор, главный научный сотрудник, лаборатория клеточной иммунотерапии

630099, Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14

Ostanin Alexander A., DM, Professor, Main Researcher, Laboratory of Cellular Immunotherapy

14, Yadrintsevskaya Str., Novosibirsk, 630099

Научно-исследовательский институт фундаментальной и клинической иммунологии (НИИФКИ)РоссияFederal State Budgetary Scientific Institution Research Institute of Fundamental and Clinical Immunology (RIFCI)Russian Federation201916052019181266276Copyright © Черных Е.Р., Тыринова Т.В., Леплина О.Ю., Тихонова М.А., Курочкина Ю.Д., Олейник Е.А., Сахно Л.В., Останин А.А., 20192019Черных Е.Р., Тыринова Т.В., Леплина О.Ю., Тихонова М.А., Курочкина Ю.Д., Олейник Е.А., Сахно Л.В., Останин А.А.Chernykh E.R., Tyrinova T.V., Leplina O.Y., Tikhonova M.A., Kurochkina Y.D., Oleynik E.A., Sakhno L.V., Ostanin A.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://bulletin.ssmu.ru/jour/article/view/2193Цель исследования

Цель исследования. Анализ взаимосвязи между субпопуляционной принадлежностью моноцитов и фенотипом и (или) функциями генерируемых дендритных клеток (dendrite cells, DC), а также их чувствительностью к толерогенному действию дексаметазона.

Материалы и методы

Материалы и методы. В исследование включены 15 здоровых доноров. DC генерировали с интерфероном альфа (IFNα) и колониестимулирующим фактором гранулоцитов и макрофагов (GM-CSF) из обогащенной популяции CD14+ моноцитов периферической крови с деплецией (CD16-Мо-DC) и без деплеции (CD16+Мо–DC) CD16+ клеток. Субпопуляции моноцитов получали методом магнитной сепарации.

Результаты

Результаты. CD16+Мо-DC характеризовались большим содержанием зрелых DC (CD83+CD14–) и меньшим количеством клеток промежуточной степени зрелости (CD14+CD83+), но были сопоставимы с CD16–Мо-DC по экспрессии HLA-DR и CD86, участвующих в презентации антигенов и активации наивных Т-клеток, а также ингибиторных (толерогенных) молекул B7-H1 и TLR-2. При этом CD16+- Мо-DC проявляли более высокую аллостимуляторную активность, которая прямо коррелировала с экспрессией CD86 (rs = 0,69) и обратно – с экспрессией TLR-2 (rs = -0,72). Аллостимуляторная активность CD16-Мо-DC находилась в прямой взаимосвязи с количеством зрелых CD14-CD83+DC и CD14+CD83+DC промежуточной степени зрелости. Добавление дексаметазона (10-6 M) в культуры CD16-Мо-DC и CD16+Мо-DC сопровождалось задержкой созревания DC, снижением экспрессии CD86 и повышением TLR-2, а также увеличением количества клеток с ингибиторным фенотипом CD86-B7-H1+, что, в свою очередь, ассоциировалось со снижением аллостимуляторной активности DC. Снижение индекса соотношения CD86+/TLR-2+ клеток в популяции CD16+Мо-DC в большей степени обусловлено уменьшением количества CD86+DC, а в популяции CD16-Мо-DC – возрастанием числа клеток TLR-2+. При этом ингибирующий эффект дексаметазона на созревание DC был более выраженным в популяции CD16+Мо-DC.

Заключение

Заключение. CD14+ моноциты, как содержащие, так и истощенные по CD16+клеткам, дифференцируются в присутствии IFNα в DC, однако наличие в общем пуле моноцитарных предшественников CD16+ клеток ассоциируется с генерацией DC с более зрелым фенотипом и высокой аллостимуляторной активностью. DC, генерированные из субпопуляций моноцитов, оппозитных по экспрессии CD16, характеризуются чувствительностью к супрессорному эффекту дексаметазона. При этом толерогенная активность дексаметазона в субпопуляциях CD16-Мо-DC и CD16+Мо-DC опосредуется с вовлечением различных механизмов.

The aim of the study was to analyze the relationship between monocyte subpopulations and phenotype/ functions of monocyte-derived dendritic cells (DCs), as well as DC sensitivity to the tolerogenic effect of dexamethasone.

Materials and methods

Materials and methods. The study included 15 healthy donors. DCs were generated by cultivating enriched fractions of CD14+ monocytes with or without CD16+cell depletion (CD16-Mo-DCs or CD16+Mo-DCs, respectively) in the presence of interferon alpha (IFNα) and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF). Monocyte subpopulations were obtained by immunomagnetic negative selection.

Results

Results. CD16+Mo-DCs were characterized by higher percentage of mature (CD83+CD14-) and lower number of semi-mature (CD14+CD83+) cells, but were similar to CD16-Mo-DCs by HLA-DR and CD86 expression, involved in the presentation of antigens and activation of naive T-cells. and also to co-inhibitory/ tolerogenic molecules B7-H1 and TLR-2. CD16+Mo-DCs displayed higher allostimulatory activity, which was positively correlated with CD86 expression (rS = 0.69; p = 0.027) and negatively – with TLR-2 expression (rS = -0.72; p = 0.1). Allostimulatory activity of CD16-Mo-DCs was positively correlated with the number of mature CD14-CD83+DCs and semi-mature CD14+CD83+DCs. Addition of dexamethasone (10-6 M) into CD16-Mo-DCs and CD16+Mo-DCs cultures led to the delay of DC maturation, the decrease of CD86 and the increase of TLR-2 expression, as well as the increase of cells with co-inhibitory CD86- B7-H1+ phenotype that was positively correlated with the reduction of DC allostimulatory activity. The decrease of CD86+/TLR-2+ index in CD16+Mo-DC population was due to the reduction of CD86+DCs and in CD16-Mo-DC population – to the increase of TLR-2+cells. Dexamethasone possessed higher inhibitory effect on DC maturation in the CD16+Mo-DC cultures.

Conclusion

Conclusion. CD14+ monocytes, both contained and depleted by CD16+ cells, can differentiate into DCs when cultured with IFNα. The presence of CD16+ cells in whole blood monocyte pool is associated with generation of DCs showed a more mature phenotype and higher allostimulatory activity. Both CD16- and CD16+ monocyte-derived DCs are sensitive to suppressive effect of dexamethasone. However, dexamethasone tolerogenic effect involves different mechanisms in CD16-Mo-DCs and CD16+Mo-DCs.

дендритные клеткиинтерферон альфааллостимуляторная активностьдексаметазонdendritic cellsinterferon-αallostimulatory activitydexamethasoneРФФИ в рамках научного проекта № 18-015-00215-АRussian Foundation for Basic Research as part of the research project No. 18-015-00215-АReferencesZiegler-Heitbrock L., Ancuta P., Crowe S., Dalod M., Grau V., Hart D.N., Leenen P.J.M., Liu Y.-J., MacPherson G., Randolph G.J., Scherberich J., Schmitz J., Shortman K., Sozzani S., Strobl H., Zembala M., Austyn J.M., Lutz M.B. Nomenclature of monocytes and dendritic cells in blood. Blood. 2010; 116: e74–80. DOI: 10.1182/blood-2010-02-258558.Ziegler-Heitbrock L., Ancuta P., Crowe S., Dalod M., Grau V., Hart D.N., Leenen P.J.M., Liu Y.-J., MacPherson G., Randolph G.J., Scherberich J., Schmitz J., Shortman K., Sozzani S., Strobl H., Zembala M., Austyn J.M., Lutz M.B. Nomenclature of monocytes and dendritic cells in blood. Blood. 2010; 116: e74–80. DOI: 10.1182/blood-2010-02-258558.Feng A.-L., Zhu J.-K., Sun J.-T., Yang M.-X., Neckenig M.R., Wang X.-W., Shao Q.-Q., Song B.-F., Yang Q.-F., Kong B.-H., Qu X. CD16+ monocytes in breast cancer patients: expanded by monocyte chemoattractant protein-1 and may be useful for early diagnosis. Clin. Exp. Immunol. 2011; 164 (1): 57–65. DOI: 10.1111/j.1365-2249.2011.04321.x.Feng A.-L., Zhu J.-K., Sun J.-T., Yang M.-X., Neckenig M.R., Wang X.-W., Shao Q.-Q., Song B.-F., Yang Q.-F., Kong B.-H., Qu X. CD16+ monocytes in breast cancer patients: expanded by monocyte chemoattractant protein-1 and may be useful for early diagnosis. Clin. Exp. Immunol. 2011; 164 (1): 57–65. DOI: 10.1111/j.1365-2249.2011.04321.x.Chara L., Sбnchez-Atrio A., Pйrez A., Cuende E., Albarrбn F., Turriуn A., Chevarria J., del Barco A.A., Sбnchez M.A., Monserrat J., Prieto A., de la Hera A., Sanz I., Diaz D., Alvarez-Mon M. The number of circulating monocytes as biomarkers of the clinical response to methotrexate in untreated patients with rheumatoid arthritis. J. Transl. Med. 2015; 13: 2. DOI: 10.1186/s12967-014-0375.y.Chara L., Sбnchez-Atrio A., Pйrez A., Cuende E., Albarrбn F., Turriуn A., Chevarria J., del Barco A.A., Sбnchez M.A., Monserrat J., Prieto A., de la Hera A., Sanz I., Diaz D., Alvarez-Mon M. The number of circulating monocytes as biomarkers of the clinical response to methotrexate in untreated patients with rheumatoid arthritis. J. Transl. Med. 2015; 13: 2. DOI: 10.1186/s12967-014-0375.y.Wong K.L., Yeap W.H., Tai J.J.Y., Ong S.M., Dang T.M., Wong S.C. The three human monocyte subsets: implications for health and disease. Immunol. Res. 2012; 53 (1–3): 41–57. DOI: 10.1007/s12026-012-8297-3.Wong K.L., Yeap W.H., Tai J.J.Y., Ong S.M., Dang T.M., Wong S.C. The three human monocyte subsets: implications for health and disease. Immunol. Res. 2012; 53 (1–3): 41–57. DOI: 10.1007/s12026-012-8297-3.Bakdash G., Sittig S.P., Dijk T. van, Figdor C.G., Vries I.J.M. de. The nature of activatory and tolerogenic dendritic cell-derived signal II. Front. Immunol. 2013; 4: 53 DOI: 10.3389/FIMMU.2013.00053.Bakdash G., Sittig S.P., Dijk T. van, Figdor C.G., Vries I.J.M. de. The nature of activatory and tolerogenic dendritic cell-derived signal II. Front. Immunol. 2013; 4: 53 DOI: 10.3389/FIMMU.2013.00053.Ancuta P., Liu K.-Y., Misra V., Wacleche V., Gosselin A., Zhou X., Gabuzda D. Transcriptional profiling reveals developmental relationship and distinct biological functions of CD16+ and CD16- monocyte subsets. BMC Genomics. 2009; 10: 403. DOI: 10.1186/1471-2164-10-403.Ancuta P., Liu K.-Y., Misra V., Wacleche V., Gosselin A., Zhou X., Gabuzda D. Transcriptional profiling reveals developmental relationship and distinct biological functions of CD16+ and CD16- monocyte subsets. BMC Genomics. 2009; 10: 403. DOI: 10.1186/1471-2164-10-403.Boyette L.B., Macedo C., Hadi K., Elinoff B.D., Walters J.T., Ramaswami B., Chalasani G., Taboas J.M., Lakkis F.G., Metes D.M. Phenotype, function, and differentiation potential of human monocyte subsets. PLoS One. 2017; 12 (4): e0176460. DOI: 10.1371/journal.pone.0176460.Boyette L.B., Macedo C., Hadi K., Elinoff B.D., Walters J.T., Ramaswami B., Chalasani G., Taboas J.M., Lakkis F.G., Metes D.M. Phenotype, function, and differentiation potential of human monocyte subsets. PLoS One. 2017; 12 (4): e0176460. DOI: 10.1371/journal.pone.0176460.Thurner B., Rцder C., Dieckmann D., Heuer M., Kruse M., Glaser A., Keikavoussi P., Kдmpgen E., Bender A., Schuler G. Generation of large numbers of fully mature and stable dendritic cells from leukapheresis products for clinical application. J. Immunol. Methods. 1999; 223: 1–15. DOI: 10.1016/S0022-1759(98)00208-7.Thurner B., Rцder C., Dieckmann D., Heuer M., Kruse M., Glaser A., Keikavoussi P., Kдmpgen E., Bender A., Schuler G. Generation of large numbers of fully mature and stable dendritic cells from leukapheresis products for clinical application. J. Immunol. Methods. 1999; 223: 1–15. DOI: 10.1016/S0022-1759(98)00208-7.Papewalis C., Jacobs B., Wuttke M., Ullrich E., Baehring T., Fenk R., Willenberg H.S., Schinner S., Cohnen M., Seissler J., Zacharowski K., Scherbaum W.A., Schott M. IFN- skews monocytes into CD56+-expressing dendritic cells with potent functional activities in vitro and in vivo. J. Immunol. 2008; 180 (3): 1462–1470. DOI: 10.4049/jimmunol.180.3.1462.Papewalis C., Jacobs B., Wuttke M., Ullrich E., Baehring T., Fenk R., Willenberg H.S., Schinner S., Cohnen M., Seissler J., Zacharowski K., Scherbaum W.A., Schott M. IFN- skews monocytes into CD56+-expressing dendritic cells with potent functional activities in vitro and in vivo. J. Immunol. 2008; 180 (3): 1462–1470. DOI: 10.4049/jimmunol.180.3.1462.Тыринова Т.В., Леплина О.Ю., Тихонова М.А., Мишинов С.В., Ступак В.В., Останин А.А., Черных Е.Р. CCL19/CCL21-зависимый хеммотаксис дендритных клеток в норме и при злокачественных опухолях головного мозга. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2014; 158 (12): 752–756. DOI: 10.1007/s10517-015-2862-4.Tyrinova T.V., Leplina O.Y., Tikhonova M.A., Mishinov S.V., Stupak V.V., Ostanin A.A., Chernykh E.R. CCL19/CCL21-dependent chemotaxis of dendritic cells in healthy individuals and patients with brain tumors. Bulletin of Experimental Biology and Medicine. 2014; 158 (12): 752–756 (in Russ.). DOI: 10.1007/s10517-015-2862-4.Leplina O. Yu., Tyrinova T.V., Tikhonova M.A., Ostanin A.A., Chernykh E.R. Interferon alpha induces generation of semi-mature dendritic cells with high pro-inflammatory and cytotoxic potential. Cytokine. 2015; 71: 1–7. DOI: 10.1016/j.cyto.2014.07.258.Leplina O. Yu., Tyrinova T.V., Tikhonova M.A., Ostanin A.A., Chernykh E.R. Interferon alpha induces generation of semi-mature dendritic cells with high pro-inflammatory and cytotoxic potential. Cytokine. 2015; 71: 1–7. DOI: 10.1016/j.cyto.2014.07.258.Курочкина Ю.Д., Леплина О.Ю., Тихонова М.А., Тыринова Т.В., Баторов Е.В., Сизиков А.Э., Останин А.А., Черных Е.Р. Влияние дексаметазона на интерферон-α- индуцированную дифференцировку моноцитов в дендритные клетки. Медицинская иммунология. 2016; 18 (4): 347–356. DOI: 10.15789/1563-0625-2016-4-347-356.Kurochkina Y.D., Leplina O.Y., Tikhonova M.A., Tyrinova T.V., Batorov E.V., Sizikov A.E., Ostanin A.A., Chernykh E.R. Effect of dexamethasone on interferon-α-induced differentiation of monocytes to dendritic cells. Med. Immunol. 2016; 18 (4): 347–356. (in Russ.). DOI: 10.15789/1563-0625-2016-4-347-356.Dopheide J.F., Zeller G.C., Kuhlmann M., Girndt M., Sester M., Sester U. Differentiation of monocyte derived dendritic cells in end stage renal disease is skewed towards accelerated maturation. Adv. Clin. Exp. Med. 2015; 24 (2): 257–266. DOI: 10.17219/acem/40463.Dopheide J.F., Zeller G.C., Kuhlmann M., Girndt M., Sester M., Sester U. Differentiation of monocyte derived dendritic cells in end stage renal disease is skewed towards accelerated maturation. Adv. Clin. Exp. Med. 2015; 24 (2): 257–266. DOI: 10.17219/acem/40463.Wong K.L., Tai J.J.-Y., Wong W.-C., Han H., Sem X., Yeap W.-H., Kourilsky P., Wong S.-C. Gene expression profiling reveals the defining features of the classical, intermediate, and nonclassical human monocyte subsets. Blood. 2011; 118 (5): e1631. DOI: 10.1182/blood-2010-12-326355.Wong K.L., Tai J.J.-Y., Wong W.-C., Han H., Sem X., Yeap W.-H., Kourilsky P., Wong S.-C. Gene expression profiling reveals the defining features of the classical, intermediate, and nonclassical human monocyte subsets. Blood. 2011; 118 (5): e1631. DOI: 10.1182/blood-2010-12-326355.Merino A., Buendia P., Martin-Malo A., Aljama P., Ramirez R., Carracedo J. Senescent CD14+CD16+ Monocytes exhibit proinflammatory and proatherosclerotic activity. J. Immunol. 2011; 186 (3): 1809–1815. DOI: 10.4049/jimmunol.1001866.Merino A., Buendia P., Martin-Malo A., Aljama P., Ramirez R., Carracedo J. Senescent CD14+CD16+ Monocytes exhibit proinflammatory and proatherosclerotic activity. J. Immunol. 2011; 186 (3): 1809–1815. DOI: 10.4049/jimmunol.1001866.Gren S.T., Rasmussen T.B., Janciauskiene S., Hеkansson K., Gerwien J.G., Grip O. A single-cell gene-expression profile reveals inter-cellular heterogeneity within human monocyte subsets. PLoS One. 2015; 10 (12): e0144351. DOI: 10.1371/journal.pone.0144351.Gren S.T., Rasmussen T.B., Janciauskiene S., Hеkansson K., Gerwien J.G., Grip O. A single-cell gene-expression profile reveals inter-cellular heterogeneity within human monocyte subsets. PLoS One. 2015; 10 (12): e0144351. DOI: 10.1371/journal.pone.0144351.Skinner N.A., MacIsaac C.M., Hamilton J.A., Visvanathan K. Regulation of Toll-like receptor (TLR)2 and TLR4 on CD14dimCD16+ monocytes in response to sepsis-related antigens. Clin. Exp. Immunol. 2005; 141 (2): 270–278. DOI: 10.1111/j.1365-2249.2005.02839.x.Skinner N.A., MacIsaac C.M., Hamilton J.A., Visvanathan K. Regulation of Toll-like receptor (TLR)2 and TLR4 on CD14dimCD16+ monocytes in response to sepsis-related antigens. Clin. Exp. Immunol. 2005; 141 (2): 270–278. DOI: 10.1111/j.1365-2249.2005.02839.x.Sakhno L.V., Tikhonova M.A., Tyrinova T.V., Leplina O.Y., Shevela E.Y., Nikonov S.D., Zhdanov O.A., Ostanin A.A., Chernykh E.R. Cytotoxic activity of dendritic cells as a possible mechanism of negative regulation of T lymphocytes in pulmonary tuberculosis. Clin. Dev. Immunol. 2012; 2012: 1–9. DOI: 10.1155/2012/628635.Sakhno L.V., Tikhonova M.A., Tyrinova T.V., Leplina O.Y., Shevela E.Y., Nikonov S.D., Zhdanov O.A., Ostanin A.A., Chernykh E.R. Cytotoxic activity of dendritic cells as a possible mechanism of negative regulation of T lymphocytes in pulmonary tuberculosis. Clin. Dev. Immunol. 2012; 2012: 1–9. DOI: 10.1155/2012/628635.Chen L., Azuma T., Yu W., Zheng X., Luo L., Chen L. B7-H1 maintains the polyclonal T cell response by protecting dendritic cells from cytotoxic T lymphocyte destruction. Proc. Natl. Acad. Sci. 2018; 115 (12): 3126– 3131. DOI: 10.1073/pnas.1722043115.Chen L., Azuma T., Yu W., Zheng X., Luo L., Chen L. B7-H1 maintains the polyclonal T cell response by protecting dendritic cells from cytotoxic T lymphocyte destruction. Proc. Natl. Acad. Sci. 2018; 115 (12): 3126– 3131. DOI: 10.1073/pnas.1722043115.Lee J.-H., Park C.-S., Jang S., Kim J.-W., Kim S.-H., Song S., Kim K., Lee C.-K. Tolerogenic dendritic cells are efficiently generated using minocycline and dexamethasone. Scientific Reports. 2017; 7: 15087. DOI: 10.1038/s41598-017-15569-1.Lee J.-H., Park C.-S., Jang S., Kim J.-W., Kim S.-H., Song S., Kim K., Lee C.-K. Tolerogenic dendritic cells are efficiently generated using minocycline and dexamethasone. Scientific Reports. 2017; 7: 15087. DOI: 10.1038/s41598-017-15569-1.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.