ssmuБюллетень сибирской медициныBulletin of Siberian Medicine1682-03631819-3684Siberian State Medical University, the Ministry of Healthcare of the Russian Federation10.20538/1682-0363-2014-5-73-78ssmu-224Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL PAPERSСИСТЕМА ГЛУТАТИОНА УЧАСТВУЕТ В РЕГУЛЯЦИИ АПОПТОЗА ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОКTHE GLUTATHIONE SYSTEM IS INVOLVED IN REGULATION OF TUMOR CELLS APOPTOSISРязанцеваН. В.RyazantsevaN. V.

Доктор медицинских наук, зав. кафедрой молекулярной медицины и клинической лабораторной диагностики

olnosareva@yandex.ruНосареваО. А.NosarevaO. L.

Кандидат медицинских наук, кафедра биохимии и молекулярной медицины

olnosareva@yandex.ruСтеноваяЕ. А.StepovayaYe. A.

Доктор медицинских наук, профессор �ой патофизиологии

olnosareva@yandex.ruЗакироваЕ. В.ZakirovaYe. V.olnosareva@yandex.ruНаумоваА. И.NaumovaA. I.olnosareva@yandex.ruВеснинаО. Н.VesninaO. N.olnosareva@yandex.ruШахристоваЕ. В.ShakhristovaYe. V.

Кандидат медицинских наук

olnosareva@yandex.ruОрловД. С.OrlovD. S.olnosareva@yandex.ruЯкушинаВ. Д.YakushinaV. D.olnosareva@yandex.ruНовицкийВ. В.NovitskyV. V.

Доктор медицинских наук, профессор, академик РАН, зав. кафедрой патофизиологии

olnosareva@yandex.ruСибирский государственный медицинский униберситет, ТомскРоссияSiberian State Medical University, TomskRussian Federation2014281020141357378Copyright © Рязанцева Н.В., Носарева О.А., Стеновая Е.А., Закирова Е.В., Наумова А.И., Веснина О.Н., Шахристова Е.В., Орлов Д.С., Якушина В.Д., Новицкий В.В., 20142014Рязанцева Н.В., Носарева О.А., Стеновая Е.А., Закирова Е.В., Наумова А.И., Веснина О.Н., Шахристова Е.В., Орлов Д.С., Якушина В.Д., Новицкий В.В.Ryazantseva N.V., Nosareva O.L., Stepovaya Y.A., Zakirova Y.V., Naumova A.I., Vesnina O.N., Shakhristova Y.V., Orlov D.S., Yakushina V.D., Novitsky V.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://bulletin.ssmu.ru/jour/article/view/224

Цель исследования – выявить роль компонентов системы глутатиона в реализации рецепторного пути апоптоза опухолевых клеток линии Jurkat.

Оценку реализации апоптоза проводили методом проточной цитофлюориметрии с использованием FITS-меченного аннексина V и пропидия иодида, количества TNF R1- и Fas-презентирующих клеток; активность каспазы-3 регистрировали спектрофлюориметрическим методом. Определение содержания восстановленного и окисленного глутатиона осуществляли спектрофотометрическим методом.

Материалом для исследования служили опухолевые клетки линии Jurkat: интактные и инкубированные в присутствии селективного ингибитора ключевого фермента синтеза глутатиона – бутионин-сульфоксимина.

Исследование показало, что система глутатиона играет важную регуляторную роль в активации рецепторного пути апоптоза опухолевых клеток линии Jurkat.

Компоненты системы глутатиона являются мишенями для активации программированной гибели при опухолевом росте.

The research objective is to determine the role of the gluthatione system components in realization of the receptor pathway of Jukart tumor cell apoptosis.

Apoptosis realization using FITC-labeled annexin V and propidium iodide as well as the amount of TNF R1- and Fas-presenting cells has been evaluated by flow cytofluorometry; activity caspase-3 registered a spektroflyuorimetrichesky method. The concentration of reduced and oxidated gluthatione has been determined by spectrophotometry.

The material for the research was intact Jukart tumor cells and the ones incubated in the presence of a selective inhibitor of the key gluthatione synthesis enzyme – buthionine-sulfoximine.

The research has shown that the gluthatione system plays an important regulatory role in activation of the receptor pathway of Jukart tumor cell apoptosis.The gluthatione system components are targets for activation of programmed cell death in tumor growth.

опухолевые клетки линии JurkatапоптозTNFFasсистема глутатионаJukart tumor cellsapoptosisTNFFasgluthatione systemReferencesМеньщикова Е.Б., Зенков Н.К., Ланкин В.З. Бондарь И.А., Труфакин В.А. Окислительный стресс: Патологические состояния и заболевания. Новосибирск: АРТА, 2008. 284 с.. Men'shhikova E.B., Zenkov N.K., Lankin V.Z. Bondar' I.A., Trufakin V.A. Oxidizing stress: Pathological states and dis-eases. Novosibirsk, ARTA Publ., 2008. 284 p.Рязанцева Н.В., Новицкий В.В., Часовских Н.Ю., Кайго-родова Е.В., Старикова Е.Г., Стариков Ю.В. Роль ре-докс-зависимых сигнальных систем в регуляции апоптоза при окислительном стрессе // Цитология. 2009. Т. 51, № 4. С. 329–334.Ryazantseva N.V., Novicky V.V., Chasovskikh N.Yu., Kajgorodova Ye.V., Starikova Ye.G., Starikov Yu.V. Role of redoks-dependent alarm systems in regulation of apoptosis at an oxidizing stress. Tsitologiya – Cytology, 2009, vol. 51, no. 4, pp. 329–334 (in Russian).Курилова Л.С., Крутецкая З.И., Лебедев О.Е., Антонов В.Г. Влияние окисленного глутатиона и его фармакологического аналога препарата глутоксим на внутриклеточную концентрацию Са2+ в макрофагах // Цитология. 2008. Т. 50, № 5. С. 452–461.Kurilova L.S., Kruteckaja Z.I., Lebedev O.E., Antonov V.G. Influence of the oxidized glutathione and its pharmacological analog of a preparation glutoksy on intracellular concentration of Ca2+ in macrophages. Tsitologiya – Cytology, 2008, vol. 50, no. 5, pp. 452–461 (in Russian).Aslan M., Canatan D. Modulation of redox pathways in neu-trophils from sickle cell disease patients // Exp. Hematol. 2008. V. 36 (11). Р. 1535–1544.Aslan M., Canatan D. Modulation of redox pathways in neu-trophils from sickle cell disease patients. Exp. Hematol., 2008, vol. 36 (11), pp. 1535–1544.Desideri E., Filomeni G., Ciriolo M.R. Glutathione partici-pates in the modulation of starvation-induced autophagy in carcinoma cells // Autophagy. 2012. V. 8 (12). Р. 1769–1781.Desideri E., Filomeni G., Ciriolo M.R. Glutathione partici-pates in the modulation of starvation-induced autophagy in carcinoma cells. Autophagy, 2012, vol. 8 (12), pp. 1769–1781.Октябрьский О.Н., СмирноваВ. Редокс-регуляция клеточных функций // Биохимия. 2007. Т. 72. Вып. 2. С. 158–174.Oktjabr'sky O.N., Smirnova G.V. Redoks-regulyation cellular functions Biokhimiya – Biochemistry, 2007, vol. 72, vyp. 2, pp. 158–174 (in Russian).Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Глутатион ядра клет-ки и его функции // Биомедицинская химия. 2010. Т. 56. Вып. 6. С. 657–662.Kulinsky V.I., Kolesnichenko L.S. Glutation of a kernel of a cage and its function. Biomeditsinskaya khimiya – Biochem-istry, 2010, vol. 56, vyp. 6, pp. 657–662 (in Russian).Laragione T., Gianazza E., Tonelli R., Bigini P., Mennini T., Casoni F., Massignan T., Bonetto V., Ghezzi P. Regulation of redox-sensitive exofacial protein thiols in CHO cells // Biol. Chem. 2006. V. 387 (10–11). P. 1371–1376.Laragione T., Gianazza E., Tonelli R., Bigini P., Mennini T., Casoni F., Massignan T., Bonetto V., Ghezzi P. Regulation of redox-sensitive exofacial protein thiols in CHO cells. Biol Chem., 2006, vol. 387 (10–11), pp. 1371–1376.Арутюнян А.В., Дубинина Е.Е., Зыбина Н.Н. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты организма. СПб., 2000. 103 c.Arutyunyan A.V., Dubinina E.E., Zyibina N.N. Methods of an assessment of free radical oxidation and antioxidant pro-tection of an organism. St. Petersburg, 2000. 103 р. (in Russian).Kojima S., Nakayama K., Ishida H. Low dose gamma-rays activate immune functions via induction of glutathione and delay tumor growth // J. Radiat. Res. 2004. V. 45, № 1. P. 33–39.Kojima S., Nakayama K., Ishida H. Low dose gamma-rays activate immune functions via induction of glutathione and delay tumor growth. J. Radiat. Res., 2004, vol. 45, no. 1, pp. 33–39.Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quanti-tation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Analyt. Biochem. 1976. V. 7, № 1, 2. P. 248–254.Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quanti-tation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analyt. Biochem., 1976, vol. 7, no. 1–2, pp. 248–254.Cohen G.M. Caspases: the executioners of apoptosis // Biochem. J. 1997. V. 326. P. 1–16.Cohen G.M. Caspases: the executioners of apoptosis. Biochem. J., 1997, vol. 326, pp. 1–16.Nicholson D.W. Caspase structure, proteolytic substrates, and function during apoptotic cell death // Cell Death and Differentiation. 1999. V. 6. P. 1028–1042.Nicholson D.W. Caspase structure, proteolytic substrates, and function during apoptotic cell death. Cell Death and Dif-ferentiation, 1999, vol. 6, pp. 1028–1042.Зенков Н.К., Меньщикова Е.Б., Ткачев В.О. Некоторые принципы и механизмы редокс-регуляции // Кислород и антиоксиданты. 2009. Вып. 1. С. 3–64.Zenkov N.K., Men'shhikova E.B., Tkachev V.O. Some principles and mechanisms of redoks-regulation. Kislorod i antioksidanty – Oxygen and antioxidants, 2009, vol. 1, pp. 3–64 (in Russian).Raza H., John A., Howarth F.C. Alterations in glutathione redox metabolism, oxidative stress, and mitochondrial function in the left ventricle of elderly zucker diabetic Fatty rat heart // Int. J. Mol. Sci. 2012. V. 13 (12). P. 16241–16254.Raza H., John A., Howarth F.C. Alterations in glutathione re-dox metabolism, oxidative stress, and mitochondrial function in the left ventricle of elderly zucker diabetic Fatty rat heart. Int. J. Mol. Sci., 2012, vol. 13 (12), pp. 16241–16254.Filomeni G., Rotilio G., Ciriolo M.R. Disulfide relays and phosphorylative cascades: partners in redox-mediated sig-naling pathways // Cell Death Differ. 2005. V. 12 (12). Р. 1555–1563.Filomeni G., Rotilio G., Ciriolo M.R. Disulfide relays and phosphorylative cascades: partners in redox-mediated signal-ing pathways. Cell Death Differ., 2005, vol. 12 (12), pp. 1555–1563.Бурова Е.Б., Василенко К.П., Антонов В.Г., Никольский Н.Н. Трансактивация рецептора эпидермального фактора роста окисленным глутатионом и его фармакологическим аналогом Глутоксим в клетках А431 // Докл. РАН. 2005. Т. 404 (1). С. 122–124.Burova E.B., Vasilenko K.P., Antonov V.G., Nikol'sky N.N. Transaktivation of a receptor of an epidermalny factor of growth by the oxidized glutathione and its pharmacological analog Glutoksy A431 in cages. Dokl. Russian Academy of Sciences, 2005, vol. 404 (1), pp. 122–124. (in Russian).Беленичев И.Ф., Черний В.И., Колесник Ю.М. и др. Рациональная нейропротекция. Донецк: Издатель Заслав-ский А.Ю., 2009. 262 с.Belenichev I.F., Cherniy V.I., Kolesnik Yu.M. et al. Rational neuropatronage. Donetsk, Izdatel Zaslavskiy A.Yu. Publ., 2009. 262 р. (in Russian).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.