ssmuБюллетень сибирской медициныBulletin of Siberian Medicine1682-03631819-3684Siberian State Medical University, the Ministry of Healthcare of the Russian Federation10.20538/1682-0363-2004-1-63-70ssmu-3603Research ArticleРЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ И СТУДЕНТОВTHE RESULTS OF YOUNG SCIENTISTS’ AND STUDENTS’ INVESTIGATIONSМорфологические методы верификации и количественной оценки апоптозаMorphological methods of verification and quantitative estimation of apoptosisМанскихВ. Н.ManskikhV. N.

студент 3-го курса лечебного факультета

г. Томск

student

Tomsk

Сибирский государственный медицинский университетРоссияSiberian State Medical UniversityRussian Federation200430032004316370Copyright © Манских В.Н., 20042004Манских В.Н.Manskikh V.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://bulletin.ssmu.ru/jour/article/view/3603

В обзоре рассмотрены существующие методические подходы к верификации АСК (апоптотической смерти клеток), основанные на изучении морфологии гибнущих клеток: рутинная световая и электронная микроскопия, флюоресцентно-микроскопическое исследование, выявление фрагментации ДНК in situ и т.д., обсуждаются основные структурные отличия некроза от апоптоза в связи с патофизиологией этих процессов и значимость конкретных морфологических изменений в дифференциальной диагностике типа клеточной смерти. Показана относительность существующих критериев АСК, многие из которых являются классическими признаками состояний клеток, ранее обозначаемых как некробиоз и коагуляционный некроз, и проанализированы причины некоторых связанных с этим обстоятельством противоречий, имеющихся в литературе, посвященной морфологии АСК.

In the review the existent methodic approaches to the verification of ACD (apoptotic cell death) based on the dying cell morphology study (routine light and electron microscopy, luminescent microscopic examination, DNA fragmentation reveal in situ and so on) have been observed, the main structural differences between necrosis and apoptosis in connection with the pathophysiology of these processes and the significance of specific morphological changes in differential diagnostics of cell death type have been discussed. It has been demonstrated the relativity of the existing ACD criterions, many of them were classic characteristics of the cell states, the former necrobiosis and coagulation necrosis. The causes of some misunderstandings, connected with this circumstance, in literature devoted to the ACD morphology, have been analyzed.

апоптознекрозморфология смерти клетокapoptosisnecrosiscell death morphologyReferencesБелушкина И.И., Северин С.Е. Молекулярные основы патологии апоптоза // Арх. пат. 2001. Т. 63. ‹ 1. С. 51—60.Белушкина И.И., Северин С.Е. Молекулярные основы патологии апоптоза // Арх. пат. 2001. Т. 63. ‹ 1. С. 51—60.Бережков Н.В. Апоптоз — управляемая смерть клетки // Арх. анат., гистол. и эмбриол. 1990. Т. 99. ‹ 12. С. 68—75.Бережков Н.В. Апоптоз — управляемая смерть клетки // Арх. анат., гистол. и эмбриол. 1990. Т. 99. ‹ 12. С. 68—75.Владимирская Е.Б., Масчан А.А., Румянцев А.Г. Апоптоз и его роль в развитии опухолевого роста // Гематол. и трансфузиол. 1997. Т. 42. С. 4—9.Владимирская Е.Б., Масчан А.А., Румянцев А.Г. Апоптоз и его роль в развитии опухолевого роста // Гематол. и трансфузиол. 1997. Т. 42. С. 4—9.Гилберт С. Биология развития. М.: Мир, 1993. 235 с.Гилберт С. Биология развития. М.: Мир, 1993. 235 с.Гинкул Л.Б., Александрова С.А., Арцабашева И.В., Швембергер И.Н. Клональный анализ гетерогенности опухолевых гепатоцитов // Вопр. онкол. 1998. Т. 47. ‹ 4. С. 456—460.Гинкул Л.Б., Александрова С.А., Арцабашева И.В., Швембергер И.Н. Клональный анализ гетерогенности опухолевых гепатоцитов // Вопр. онкол. 1998. Т. 47. ‹ 4. С. 456—460.Гистология // Ю.И. Афанасьев, Н.А. Юрина, В.Ф. Котовский и др. / Под ред. Ю.И. Афанасьева, Н.А. Юриной. М.: Медицина, 2001. 744 с.Гистология // Ю.И. Афанасьев, Н.А. Юрина, В.Ф. Котовский и др. / Под ред. Ю.И. Афанасьева, Н.А. Юриной. М.: Медицина, 2001. 744 с.Дудич Е.И., Семенкова Л.Н., Дудич И.В. и др. Изучение апоптоза раковых клеток, индуцированного α-фетопротеином // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2000. Т. 130. ‹ 12. С. 604—612.Дудич Е.И., Семенкова Л.Н., Дудич И.В. и др. Изучение апоптоза раковых клеток, индуцированного α-фетопротеином // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2000. Т. 130. ‹ 12. С. 604—612.Зарецкая А.И. Электронно-микроскопический анализ апоптоза рака прямой кишки до и после облучения // Арх. пат. 1988. Т. 50. ‹ 1. С. 46—52.Зарецкая А.И. Электронно-микроскопический анализ апоптоза рака прямой кишки до и после облучения // Арх. пат. 1988. Т. 50. ‹ 1. С. 46—52.Квачева Ю.Е. Морфологические типы радиационноиндуцированной гибели клеток кроветворной ткани, ее биологическая суть и значимость на различных этапах развития острого радиационного поражения // Радиационная биология. Радиоэкология. 2002. Т. 42. ‹ 10. С. 287—292.Квачева Ю.Е. Морфологические типы радиационноиндуцированной гибели клеток кроветворной ткани, ее биологическая суть и значимость на различных этапах развития острого радиационного поражения // Радиационная биология. Радиоэкология. 2002. Т. 42. ‹ 10. С. 287—292.Коган Е.А. Некроз. Лекции по общей патологической анатомии / Под ред. В.В. Серова, М.А. Пальцева. М.: Медицина, 1996. С. 78—90.Коган Е.А. Некроз. Лекции по общей патологической анатомии / Под ред. В.В. Серова, М.А. Пальцева. М.: Медицина, 1996. С. 78—90.Лонская И.А., Чернова О.А., Чернов В.М. Два различных типа апоптоза в тимоцитах // Цитология. 2001. Т. 43. ‹ 3. С. 244—249.Лонская И.А., Чернова О.А., Чернов В.М. Два различных типа апоптоза в тимоцитах // Цитология. 2001. Т. 43. ‹ 3. С. 244—249.Лукьянова К.Ю., Кулик Г.И., Чехун В.Ф. Роль генов р53 и bcl-2 в апоптозе и лекарственной резистентности опухолей // Вопр. онкол. 2000. Т. 46. ‹ 2. С. 121—128.Лукьянова К.Ю., Кулик Г.И., Чехун В.Ф. Роль генов р53 и bcl-2 в апоптозе и лекарственной резистентности опухолей // Вопр. онкол. 2000. Т. 46. ‹ 2. С. 121—128.Лянгузова М.С., Поспелов В.А., Кислякова Т.В. Дифференцированные клетки тератокарциномы мыши линии F9 вступают в апоптоз при разрыве контакта с субстратом // Цитология. 2001. Т. 42. ‹ 10. С. 955—962.Лянгузова М.С., Поспелов В.А., Кислякова Т.В. Дифференцированные клетки тератокарциномы мыши линии F9 вступают в апоптоз при разрыве контакта с субстратом // Цитология. 2001. Т. 42. ‹ 10. С. 955—962.Маянский Н.А., Заславская М.И., Маянский А.Н. Апоптоз экссудативных нейтрофилов человека // Иммунология. 2000. Т. 22. ‹ 2. С. 11—13.Маянский Н.А., Заславская М.И., Маянский А.Н. Апоптоз экссудативных нейтрофилов человека // Иммунология. 2000. Т. 22. ‹ 2. С. 11—13.Маянский Н.А. Субклеточное перераспределение bax и его слияние с митохондриями при спонтанном апоптозе нейтрофилов // Иммунология. 2001. Т. 22. ‹ 6. С. 29—31.Маянский Н.А. Субклеточное перераспределение bax и его слияние с митохондриями при спонтанном апоптозе нейтрофилов // Иммунология. 2001. Т. 22. ‹ 6. С. 29—31.Маянский Н.А. Действие липополисахаридов и УФ-облучения на регуляцию апоптоза нейтрофилов человека // Иммунология. 2001. Т. 22. ‹ 2. С. 25—27.Маянский Н.А. Действие липополисахаридов и УФ-облучения на регуляцию апоптоза нейтрофилов человека // Иммунология. 2001. Т. 22. ‹ 2. С. 25—27.Маянский Н.А. Состояние каспазы 3 при подавлении апоптоза нейтрофилов гранулоцитарно-макрофагальным КС // Иммунология. 2001. Т. 22. ‹ 2. С. 22—25.Маянский Н.А. Состояние каспазы 3 при подавлении апоптоза нейтрофилов гранулоцитарно-макрофагальным КС // Иммунология. 2001. Т. 22. ‹ 2. С. 22—25.Маянский Н.А. Каспазозависимый механизм апоптоза нейтрофилов: апоптогенный эффект туморо-некротического фактора α // Иммунология. 2002. Т. 23. ‹ 1. С. 15—18.Маянский Н.А. Каспазозависимый механизм апоптоза нейтрофилов: апоптогенный эффект туморо-некротического фактора α // Иммунология. 2002. Т. 23. ‹ 1. С. 15—18.Михайлов В.М., Комаров С.А., Нилов В.К. и др. Ультраструктурный и морфометрический анализ стадий апоптоза кардиомиоцитов мышей MDХ // Цитология. 2001. Т. 43. ‹ 8. 729—735.Михайлов В.М., Комаров С.А., Нилов В.К. и др. Ультраструктурный и морфометрический анализ стадий апоптоза кардиомиоцитов мышей MDХ // Цитология. 2001. Т. 43. ‹ 8. 729—735.Мошникова А.Б., Мошников С.А., Афанасьев В.Н. и др. Диметилсуберимат как специфический индуктор апоптоза трансформированных клеточных культур // Цитология. 2001. Т. 43. ‹ 8. С. 747—753.Мошникова А.Б., Мошников С.А., Афанасьев В.Н. и др. Диметилсуберимат как специфический индуктор апоптоза трансформированных клеточных культур // Цитология. 2001. Т. 43. ‹ 8. С. 747—753.Никонова М.Ф., Литвина М.М., Варфоломеева М.И., Ярилина А.А. Апоптоз и пролиферация как альтернативные формы ответа Т-лимфоцитов на стимуляцию // Иммунология. 1999. Т. 21. ‹ 2. С. 20—23.Никонова М.Ф., Литвина М.М., Варфоломеева М.И., Ярилина А.А. Апоптоз и пролиферация как альтернативные формы ответа Т-лимфоцитов на стимуляцию // Иммунология. 1999. Т. 21. ‹ 2. С. 20—23.Пальцев М.А. Морфология повреждения. Лекции по общей патологической анатомии / Под ред. В.В. Серова, М.А. Пальцева. М.: Медицина, 1996. С. 17—29.Пальцев М.А. Морфология повреждения. Лекции по общей патологической анатомии / Под ред. В.В. Серова, М.А. Пальцева. М.: Медицина, 1996. С. 17—29.Райхлин Н.Т., Райхлин А.Н. Регуляция и проявления апоптоза в физиологических условиях и в опухолях // Вопр. онкол. 2002. Т. 48. ‹ 2. С. 159—171.Райхлин Н.Т., Райхлин А.Н. Регуляция и проявления апоптоза в физиологических условиях и в опухолях // Вопр. онкол. 2002. Т. 48. ‹ 2. С. 159—171.Фридлянская И.И., Демидов О.Н., Булатова М.М. Индукция апоптоза в клетках мышиной миеломы NS0/1, трансформированной геном основного белка теплового шока // Цитология. 2000. Т. 42. ‹ 11. С. 1053—1509.Фридлянская И.И., Демидов О.Н., Булатова М.М. Индукция апоптоза в клетках мышиной миеломы NS0/1, трансформированной геном основного белка теплового шока // Цитология. 2000. Т. 42. ‹ 11. С. 1053—1509.Фильченков А.А. Стойка Р.С. Апоптоз: краткая история, молекулярные механизмы, методы выявления и возможное значение в онкологии // Эксперим. онкол. 1995. ‹ 18. С. 435—448.Фильченков А.А. Стойка Р.С. Апоптоз: краткая история, молекулярные механизмы, методы выявления и возможное значение в онкологии // Эксперим. онкол. 1995. ‹ 18. С. 435—448.Хавинсон В.Х., Южаков В.В., Кветной И.М., Малинин В.В. Влияние эпиталона на кинетику роста и функциональную морфологию саркомы М.1 // Вопр. онкол. 2001. Т. 47. ‹ 4. С. 461—466.Хавинсон В.Х., Южаков В.В., Кветной И.М., Малинин В.В. Влияние эпиталона на кинетику роста и функциональную морфологию саркомы М.1 // Вопр. онкол. 2001. Т. 47. ‹ 4. С. 461—466.Хавинсон В.Х., Кветной И.М. Пептидные биорегуляторы ингибируют апоптоз // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2000. Т. 130. ‹ 12. С. 657—659.Хавинсон В.Х., Кветной И.М. Пептидные биорегуляторы ингибируют апоптоз // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2000. Т. 130. ‹ 12. С. 657—659.Хансон К.П., Имянитов Е.Н., Посохов В.С., Розенберг О.А. Модификация чувствительности к апоптозу клеток асцитной карциномы Эрлиха путем трансфекции ДНК из тимоцитов // Вопр. онкол. 1998. Т. 44. ‹ 6. С. 701—703.Хансон К.П., Имянитов Е.Н., Посохов В.С., Розенберг О.А. Модификация чувствительности к апоптозу клеток асцитной карциномы Эрлиха путем трансфекции ДНК из тимоцитов // Вопр. онкол. 1998. Т. 44. ‹ 6. С. 701—703.Цинзерлинг А.В., Цинзерлинг В.П. Патологическая анатомия. М.: Медицина, 1996. 370 с.Цинзерлинг А.В., Цинзерлинг В.П. Патологическая анатомия. М.: Медицина, 1996. 370 с.Шаповалов В.Д., Михалева Л.М. Апоптоз и ультраструктурные изменения плазматических клеток собственно слизистой оболочки десны больных парадонтозом // Иммунология. 2002. Т. 23. ‹ 2. С. 83—86.Шаповалов В.Д., Михалева Л.М. Апоптоз и ультраструктурные изменения плазматических клеток собственно слизистой оболочки десны больных парадонтозом // Иммунология. 2002. Т. 23. ‹ 2. С. 83—86.Afanasev V.N., Korol B.A., Mantsygin Yu.A. et al. Flow cytometry and biochemical analisis of DNA degradation charachteristic of two types of cell death // FEBS Lett. 1986. V. 194. P. 347—350.Afanasev V.N., Korol B.A., Mantsygin Yu.A. et al. Flow cytometry and biochemical analisis of DNA degradation charachteristic of two types of cell death // FEBS Lett. 1986. V. 194. P. 347—350.Arends M.J., Morris R.G., Wyllie A. Apoptois. The role of endonuclease // Amer. J. Path. 1990. V. 136. P. 593—608.Arends M.J., Morris R.G., Wyllie A. Apoptois. The role of endonuclease // Amer. J. Path. 1990. V. 136. P. 593—608.Bonkhoff H., Fixemer T., Hansicker I., Remberger K. Simultaneous detection of DNA fragmentation (apoptosis), cell proliferation (MIB-1), and phenotype markers in routinely processed tissue sections // Virchows Archiv. 1999. V. 434. ‹ 1. P. 71—73.Bonkhoff H., Fixemer T., Hansicker I., Remberger K. Simultaneous detection of DNA fragmentation (apoptosis), cell proliferation (MIB-1), and phenotype markers in routinely processed tissue sections // Virchows Archiv. 1999. V. 434. ‹ 1. P. 71—73.Columbano A. Cell death: current difficulties in discrining apoptosis from necrosis in the context of pathological processes in vivo // J. Cell. Biochem. 1995. V. 58. P. 181—190.Columbano A. Cell death: current difficulties in discrining apoptosis from necrosis in the context of pathological processes in vivo // J. Cell. Biochem. 1995. V. 58. P. 181—190.Horton J., Milner A., Horton T. et al. Apoptosis-specific protein (ASP) identified in apoptotic Xenopus thymus tumor cells //Dev. Immunol. 1998. V. 5. ‹ 4. P. 333—348.Horton J., Milner A., Horton T. et al. Apoptosis-specific protein (ASP) identified in apoptotic Xenopus thymus tumor cells //Dev. Immunol. 1998. V. 5. ‹ 4. P. 333—348.Kochx M. Apoptosis in the ateroma // Arteriosclerosis, Tromb. and Vasc. Biol. 1998. ‹ 18. P. 1519—1522.Kochx M. Apoptosis in the ateroma // Arteriosclerosis, Tromb. and Vasc. Biol. 1998. ‹ 18. P. 1519—1522.Majno G., Joris I. Apoptosis, oncosis and necrosis //Amer. J. Path. 1995. V. 146. P. 3—15.Majno G., Joris I. Apoptosis, oncosis and necrosis //Amer. J. Path. 1995. V. 146. P. 3—15.McMahan R., Jonson R.O., Ruben L.N., Clothier R.H. Apoptosis and the cell cycle in Xenopus laevis: PHA and PMA exposure of splenocytes // Immynol. Lett. 1999. V. 70. ‹ 3. P. 179—183.McMahan R., Jonson R.O., Ruben L.N., Clothier R.H. Apoptosis and the cell cycle in Xenopus laevis: PHA and PMA exposure of splenocytes // Immynol. Lett. 1999. V. 70. ‹ 3. P. 179—183.Moser B. Silver stain for the detection of apoptosis at the light microscopy // Micr. Anat. 1995. V. 37. 27—29.Moser B. Silver stain for the detection of apoptosis at the light microscopy // Micr. Anat. 1995. V. 37. 27—29.Sarnaf C.E., Bowen I.D. Kinetic stadies on a murine sarcoma and analisis of apoptosis // Brit. J. Cancer. 1986. V. 54. P. 989—998.Sarnaf C.E., Bowen I.D. Kinetic stadies on a murine sarcoma and analisis of apoptosis // Brit. J. Cancer. 1986. V. 54. P. 989—998.Steller H. Mechanisms and genes of cellular suicide // Science. 1995. V. 267. P. 1445—1449.Steller H. Mechanisms and genes of cellular suicide // Science. 1995. V. 267. P. 1445—1449.Walker P.R. Sikorska M. Endonuclease activities and DNA – degradation in apoptosis // Biochim. Cell Biol. 1994. V. 72. P. 615—623.Walker P.R. Sikorska M. Endonuclease activities and DNA – degradation in apoptosis // Biochim. Cell Biol. 1994. V. 72. P. 615—623.Weedon D., Searl J., Kerr J.F. Apoptosis. Its nature and implications for dermatopathology // Am. J. Dermatopathol. 1979. V. 1. ‹ 2. P. 133—144.Weedon D., Searl J., Kerr J.F. Apoptosis. Its nature and implications for dermatopathology // Am. J. Dermatopathol. 1979. V. 1. ‹ 2. P. 133—144.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.