ssmuБюллетень сибирской медициныBulletin of Siberian Medicine1682-03631819-3684Siberian State Medical University, the Ministry of Healthcare of the Russian Federation10.20538/1682-0363-2020-4-179-188ssmu-4167Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL PAPERSЭкспрессия провоспалительных и костимулирующих молекул на макрофагах in vitro у больных туберкулезом легкихExpression of pro-inflammatory and co-stimulatory molecules on the surface of macrophages in vitro in patients with pulmonary tuberculosishttps://orcid.org/0000-0002-8509-9921ЧуринаЕ. Г.ChurinaE. G.

д-р мед. наук, профессор, кафедра патофизиологии; профессор, кафедра органическойхимии, вед. науч. сотрудник, лаборатория трансляционной клеточной и молекулярной биомедицины

Россия, 634050, г. Томск, Московский тракт, 2

Россия, 634050, г. Томск, пр. Ленина, 36

2, Mosсow Trakt, Tomsk, 634050, Russian Federation

36, Lenina Av., Tomsk, 634050, Russian Federation

 

Lena1236@yandex.ruСитниковаА. В.SitnikovaA. V.

аспирант, кафедра патофизиологии

Россия, 634050, г. Томск, Московский тракт, 2

2, Mosсow Trakt, Tomsk, 634050, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0002-9457-8879УразоваО. И.UrazovaO. I.

д-р мед. наук, профессор, член-корр. РАН, зав. кафедрой патофизиологии; профессор,кафедра комплексной информационной безопасности электронно-вычислительных систем

Россия, 634050, г. Томск, Московский тракт, 2

Россия, 634050, г. Томск, пр. Ленина, 40

2, Mosсow Trakt, Tomsk, 634050, Russian Federation

40, Lenina Av., Tomsk, 634050, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0001-5758-7330ПатышеваМ. Р.NovitskiyV. V.

мл. науч. сотрудник, лаборатория биологии опухолевой прогрессии, НИИ онкологии; мл. науч. сотрудник, лаборатория трансляционной клеточной и молекулярной биомедицины

Россия, 634050, г. Томск, пр. Ленина, 36

Россия, 634009, г. Томск, пер. Кооперативный, 5

2, Mosсow Trakt, Tomsk, 634050, Russian Federation

40, Lenina Av., Tomsk, 634050, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0002-9577-8370НовицкийВ. В.PatyshevaM. R.

д-р мед. наук, профессор, академик РАН, заслуженный деятель науки РФ, кафедрапатофизиологии; профессор, кафедра комплексной информационной безопасности электронно-вычислительных систем

Россия, 634050, г. Томск, Московский тракт, 2

Россия, 634050, г. Томск, пр. Ленина, 40

36, Lenina Av., Tomsk, 634050, Russian Federation

5, Kooperativny Str., Tomsk, 634009, Russian Federation

 

ГолубчиковП. Н.GolubchikovP. N.

17/1, R. Luksemburg Str., Tomsk, 634009, Russian Federation

СтепановаЕ. П.StepanovaE. P.

17/1, R. Luksemburg Str., Tomsk, 634009, Russian Federation

Сибирский государственный медицинский университет (СибГМУ); Национальный исследовательский Томский государственный университет (НИ ТГУ)РоссияSiberian State Medical University; National Research Tomsk State UniversityRussian FederationСибирский государственный медицинский университет (СибГМУ)РоссияSiberian State Medical UniversityRussian FederationСибирский государственный медицинский университет (СибГМУ); Томский государственный университет систем управления и радиоэлектроники(ТУСУР)РоссияSiberian State Medical University; Tomsk State University of Control Systems and RadioelectronicsRussian FederationНациональный исследовательский Томский государственный университет (НИ ТГУ); Научно-исследовательский институт (НИИ) онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр (НИМЦ) Российской академии наукРоссияSiberian State Medical University; Tomsk State University of Control Systems and RadioelectronicsRussian FederationСибирский государственный медицинский университет (СибГМУ); Томский государственный университет систем управления и радиоэлектроники(ТУСУР)РоссияNational Research Tomsk State University; Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, the Russian Academy of SciencesRussian FederationТомский фтизиопульмонологический медицинский центрРоссияTomsk Phthisiopulmonological Medical CenterRussian Federation202007012021194179188Copyright © Чурина Е.Г., Ситникова А.В., Уразова О.И., Патышева М.Р., Новицкий В.В., Голубчиков П.Н., Степанова Е.П., 20212021Чурина Е.Г., Ситникова А.В., Уразова О.И., Патышева М.Р., Новицкий В.В., Голубчиков П.Н., Степанова Е.П.Churina E.G., Sitnikova A.V., Urazova O.I., Novitskiy V.V., Patysheva M.R., Golubchikov P.N., Stepanova E.P.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://bulletin.ssmu.ru/jour/article/view/4167

Цель работы – установить особенности экспрессии провоспалительных и костимулирующих молекул на макрофагах in vitro у больных туберкулезом легких в зависимости от клинической формы заболевания и чувствительности возбудителя к противотуберкулезным лекарственным средствам.

Материалы и методы

Материалы и методы. Обследованы 40 пациентов (36 мужчин и 4 женщины): 18  пациентов с диссеминированным туберкулезом легких (ДТБ) (16 мужчин и 2 женщины,  средний возраст (44,56 ± 8,10) лет) и 22 пациента с инфильтративным туберкулезом легких (ИТБ) (20 мужчин и 2 женщины, средний возраст (46,54 ± 5,24) лет) c туберкулезом легких (ТБ). Из них было 30 пациентов, выделяющих Mycobacterium tuberculosis (MBT), чувствительные к основным противотуберкулезным средствам (ПТС), и 10 пациентов, выделяющих MBT, устойчивые к лекарственным  средствам основного ряда противотуберкулезной терапии. Группу сравнения составили 15 здоровых доноров с сопоставимыми характеристиками по полу и возрасту.Материалом исследования являлась венозная кровь. Для выделения моноцитов из цельной крови с целью их трансформации в макрофаги использовали метод центрифугирования в градиенте фиколла плотностью 1,077 г/см3 с последующей иммуномагнитной сепарацией CD14+ клеток. Моноциты культивировали в полной питательной среде X-VIVO 10 с добавлением колониестимулирующего фактора макрофагов (M-CSF) (5 нг/мл) в концентрации 1×106 клеток/мл со стимуляторами: интерлейкином (IL) 4 (10 нг/мл) и интерфероном (IFN) γ (100 нг/мл).  Иммунофенотипирование макрофагов проводили с использованием моноклональныхантител к CD80, CD86, HLA-DR на проточном цитометре Beckman Coulter CytoFLEX LX (Beckman Coulter, США). Анализ полученных данных осуществляли при помощи программного приложения CytExpert 2.0 (Beckman Coulter, США). Полученные результаты анализировали статистическими методами.

Результаты

Результаты. Количество интактных и стимулированных цитокинами (IL-4 и IFNγ) CD80- позитивных макрофагов у больных ИТБ и с лекарственно-устойчивым ТБ (ЛУ ТБ)  превышало их число не только у здоровых доноров, но и у больных ДТБ и с лекарственно-чувствительным ТБ (ЛЧ ТБ) соответственно. Кроме того, у больных ИТБ и ЛУ ТБ регистрировалось повышение экспрессии CD86 на макрофагах после добавления в суспензионную культуру IFNγ (индуктор М1-активации). У больных ДТБ и ЛЧ ТБ количество макрофагов с экспрессией костимулирующих молекул семейства В7 при индукции цитокинами, напротив, снижалось или сохранялось в пределах нормы в отсутствие реакции на цитокины. Дефицит HLA-DR-позитивных макрофагов обнаруживался у всех больных ТБ. Минимальное число макрофагов, экспрессирующих  HLADR, установлено у больных ДТБ и ЛЧ ТБ после инкубации клеток с IL-4 (индуктор  М2-активации).

Заключение

Заключение. Оценка экспрессии мембранных молекул B7 (CD80/86) и HLA-DR на макрофагах у больных ТБ позволяет сделать вывод о нарушениях  противотуберкулезного иммунного ответа на стадии презентации антигена (у всех обследованных больных ТБ) и костимуляции (при ДТБ и ЛЧ ТБ). Увеличение экспрессии макрофагами поверхностных молекул CD80 (при М1- и М2-стимуляции) и  CD86 (при М1-стимуляции) у больных ИТБ и ЛУ ТБ свидетельствует о повышении реактивности клеток при данных формах течения ТБ. Наряду с этим дефицит экспрессии на макрофагах HLA-DR (ключевого маркера провоспалительной активации клеток) при ТБ можно рассматривать как общий (не зависящий от клинической формы болезни и  лекарственной чувствительности возбудителя) патогенетический фактор иммунного  дисбаланса при туберкулезе легких. 

The aim of this study was to identify features of the expression of pro-inflammatory and co-stimulatory molecules on the surface of macrophages in vitro in patients with pulmonary tuberculosis, depending on the clinical form of the disease and sensitivity of the pathogen to anti-TB drugs.

Materials and methods

Materials and methods. 40 patients (36 men and 4 women) with pulmonary tuberculosis (TB) were examined: 18 patients (16 men and 2 women, average age (44.56 ± 8.10) years) with disseminated tuberculosis (DTB) and  22 patients (20 men and 2 women, average age (46.54 ± 5.24) years) with infiltrative tuberculosis (ITB). Of those, 30 patients secreted Mycobacterium tuberculosis (MBT) sensitive to the basic anti-TB drugs (ATBD), and 10 patients secreted MBT resistant to first-line anti-TB drugs. Venous blood was the study material. To isolate monocytes from the whole blood in order to transform them into macrophages, ficoll density gradient centrifugation with gradient density of 1.077 g/cm3 was used followed by immunomagnetic separation of CD14+ cells. Monocytes were cultured in a complete culture medium X-VIVO 10 with gentamicin and phenol red with the addition of the macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) (5 ng/ml) at a concentration of 1×106 cells/ml with the following stimulators: interleukin (IL) 4 (10 ng/ml) and interferon (IFN) γ (100 ng/ml). Immunophenotyping of macrophages was performed using monoclonal antibodies to CD80, CD86, and HLA-DR on a Beckman Coulter CytoFLEX LX flow cytometer (Beckman Coulter, USA). The analysis of the obtained data was carried out using the CytExpert 2.0 software application. The results were analyzed using statistical methods.

Results

Results. The number of intact and cytokine-stimulated (IL-4 and IFNγ) CD80-positive macrophages in patients with ITB and drug-resistant TB (DR TB) exceeded their number not only in healthy donors, but also in patients with DTB and drug-sensitive TB (DS TB), respectively. In addition, an increase in CD86 expression on the surface of macrophages was registered in patients with ITB and DR TB after adding IFNγ (M1-activation inducer) to the suspension culture. In contrast, in patients with DTB and DS TB, the number of macrophages with expression of B7 family co-stimulating molecules decreased or remained within the normal values in the absence of a reaction to cytokines during cytokine induction. Deficiency of HLA-DR-positive macrophages was found in all TB patients. The minimal number of macrophages expressing HLA-DR was found in patients with DTB and DS TB after cell incubation with IL-4 (M2-activation inducer).

Conclusion

Conclusion. Evaluation of the expression of B7 (CD80/86) and HLA-DR membrane molecules on macrophages in TB patients allows to conclude that anti-TB immune response is impaired at stages of antigen presentation (in all examined patients with TB) and co-stimulation (in DTB and DS TB). An increase in the expression of macrophage surface molecules CD80 (with M1- and M2-stimulation) and CD86 (with M1-stimulation) in patients with ITB and DR TB indicates an increase in cell reactivity in these forms of TB. In addition, deficit of expression of HLA-DR (a key marker of pro-inflammatory cell activation) on the surface of macrophages in TB can be considered as a general (independent of the clinical form of the disease and drug sensitivity of the pathogen) pathogenetic factor of immune imbalance in pulmonary tuberculosis.

макрофагитуберкулез легкихврожденный иммунитетиммунный ответкостимулирующие молекулыIL-4IFNγCD80CD86HLA-DRmacrophagespulmonary tuberculosisinnate immunityimmune responseco-stimulating moleculesIL-4IFNγCD80CD86HLA-DRИсследование выполнено при финансовой поддержке Совета по грантам Президента Российской Федерации для ведущих научных школ (НШ-2690.2018.7) и РФФИ в рамках научного проекта № 19-315-90018.The reported study was funded by Council for Grants of the President of the Russian Federation for leading scientific schools (SS-2690.2018.7) and the RFBR, project number 19-315-90018.ReferencesНовицкий В.В., Уразова О.И., Стрелис А.К., Воронкова О.В., Филинюк О.В., Шилько Т.А. Патология иммунитета: причина или следствие туберкулезной инфекции? Бюллетень сибирской медицины. 2006; 5 (2): 70–74.Новицкий В.В., Уразова О.И., Стрелис А.К., Воронкова О.В., Филинюк О.В., Шилько Т.А. Патология иммунитета: причина или следствие туберкулезной инфекции? Бюллетень сибирской медицины. 2006; 5 (2): 70–74.Murray P., Wynn T. Protective and pathogenic functions of macrophage subsets. Nat. Rev. Immunol. 2011; 11 (11): 723–737. DOI: 10.1038/nri3073.Murray P., Wynn T. Protective and pathogenic functions of macrophage subsets. Nat. Rev. Immunol. 2011; 11 (11): 723–737. DOI: 10.1038/nri3073.Чурина Е.Г., Ситникова А.В., Уразова О.И., Чумакова С.П., Винс М.В., Береснева А.Е., Новицкий В.В. Макрофаги при бактериальных болезнях легких: фенотип и функции (обзор). Бюллетень сибирской медицины. 2019; 18 (1): 142–154. DOI: 10.20538/1682-0363-2019-1-142-154.Чурина Е.Г., Ситникова А.В., Уразова О.И., Чумакова С.П., Винс М.В., Береснева А.Е., Новицкий В.В. Макрофаги при бактериальных болезнях легких: фенотип и функции (обзор). Бюллетень сибирской медицины. 2019; 18 (1): 142–154. DOI: 10.20538/1682-0363-2019-1-142-154.Swirski F.K., Nahrendorf M. Leukocyte behavior in atherosclerosis, myocardial infarction, and heart failure. Science. 2013; 339 (6116): 161–166. DOI: 10.1126/science.1230719.Swirski F.K., Nahrendorf M. Leukocyte behavior in atherosclerosis, myocardial infarction, and heart failure. Science. 2013; 339 (6116): 161–166. DOI: 10.1126/science.1230719.Possamai L.A., Thursz M.R., Wendon J.A., Antoniades C.G. Modulation of monocyte/macrophage function: a therapeutic strategy in the treatment of acute liver failure. J. Hepatol. 2014; 61 (2): 439–445. DOI: 10.1016/j.jhep.2014.03.031.Possamai L.A., Thursz M.R., Wendon J.A., Antoniades C.G. Modulation of monocyte/macrophage function: a therapeutic strategy in the treatment of acute liver failure. J. Hepatol. 2014; 61 (2): 439–445. DOI: 10.1016/j.jhep.2014.03.031.Cassetta L., Cassol E., Poli G. Macrophage polarization in health and disease. Sci. World J. 2011; 11: 2391– 2402. DOI: 10.1100/2011/213962.Cassetta L., Cassol E., Poli G. Macrophage polarization in health and disease. Sci. World J. 2011; 11: 2391– 2402. DOI: 10.1100/2011/213962.Hussell T., Bell T. Alveolar macrophages: plasticity in a tissue-specific context. Immunol. 2014; 14 (2): 81–93. DOI: 10.1038/nri3600.Hussell T., Bell T. Alveolar macrophages: plasticity in a tissue-specific context. Immunol. 2014; 14 (2): 81–93. DOI: 10.1038/nri3600.Hoeffel G., Ginhoux F. Ontogeny of tissue-resident macrophages. Immunology. 2015; 6: 486. DOI: 10.3389/fimmu.2015.00486.Hoeffel G., Ginhoux F. Ontogeny of tissue-resident macrophages. Immunology. 2015; 6: 486. DOI: 10.3389/fimmu.2015.00486.Schenk M., Fabri M., Krutzik S.R., Lee D.J., Vu D.M., Sieling P.A., Montoya D., Liu P.T., Modlin R.L. Interleukin- 1β triggers the differentiation of macrophages with enhanced capacity to present mycobacterial antigen to T cells. Immunology. 2014; 141 (2): 174–180. DOI: 10.1111/imm.12167.Schenk M., Fabri M., Krutzik S.R., Lee D.J., Vu D.M., Sieling P.A., Montoya D., Liu P.T., Modlin R.L. Interleukin- 1β triggers the differentiation of macrophages with enhanced capacity to present mycobacterial antigen to T cells. Immunology. 2014; 141 (2): 174–180. DOI: 10.1111/imm.12167.Gordon S., Martinez F.O. Alternative activation of macrophages: mechanism and functions. Immunity. 2010; 32 (5): 593–604. DOI: 10.1016/j.immuni.2010.05.007.Gordon S., Martinez F.O. Alternative activation of macrophages: mechanism and functions. Immunity. 2010; 32 (5): 593–604. DOI: 10.1016/j.immuni.2010.05.007.Martinez F.O., Sica A., Mantovani A., Locati M. Macrophage activation and polarization. Front. Biosci. 2008; 1 (13): 453–461. DOI: 10.2741/2692.Martinez F.O., Sica A., Mantovani A., Locati M. Macrophage activation and polarization. Front. Biosci. 2008; 1 (13): 453–461. DOI: 10.2741/2692.Peyravian N., Gharib E., Moradi A., Mobahat M., Tarban P., Azimzadeh P., Nazemalhosseini-Mojarad E., Asadzadeh Aghdaei H. Evaluating the expression level of co-stimulatory molecules CD 80 and CD 86 in different types of colon polyps. Curr. Res. Transl. Med. 2018; 66 (1): 19–25. DOI: 10.1016/j.retram.2017.11.003.Peyravian N., Gharib E., Moradi A., Mobahat M., Tarban P., Azimzadeh P., Nazemalhosseini-Mojarad E., Asadzadeh Aghdaei H. Evaluating the expression level of co-stimulatory molecules CD 80 and CD 86 in different types of colon polyps. Curr. Res. Transl. Med. 2018; 66 (1): 19–25. DOI: 10.1016/j.retram.2017.11.003.Owen J., Punt J., Stranford S., Jones P., Kuby J. Kuby Immunology. New York: W.H. Freeman & Co., 2013: 574.Owen J., Punt J., Stranford S., Jones P., Kuby J. Kuby Immunology. New York: W.H. Freeman & Co., 2013: 574.Scarpa M., Brun P., Scarpa M., Morgan S., Porzionato A., Kotsafti A., Bortolami M., Buda A., D’Incà R., Macchi V.,Scarpa M., Brun P., Scarpa M., Morgan S., Porzionato A., Kotsafti A., Bortolami M., Buda A., D’Incà R., Macchi V.,Sturniolo G.C., Rugge M., Bardini R., Castagliuolo J., Angriman I., Castoro C. CD80-CD28 signaling controls the progression of inflammatory colorectal carcinogenesis. Oncotarget. 2015; 6 (24): 20058–20069. DOI: 10.18632/oncotarget.2780.Sturniolo G.C., Rugge M., Bardini R., Castagliuolo J., Angriman I., Castoro C. CD80-CD28 signaling controls the progression of inflammatory colorectal carcinogenesis. Oncotarget. 2015; 6 (24): 20058–20069. DOI: 10.18632/oncotarget.2780.Ganesan A., Moon T.C., Barakat K.H. Revealing the atomistic details behind the binding of B7–1 to CD28 and CTLA-4: A comprehensive protein-protein modelling study. Biochimica et Biophysica Acta (BBA). 2018; 1862 (12): 2764–2778. DOI: 10.1016/j.bbagen.2018.08.010.Ganesan A., Moon T.C., Barakat K.H. Revealing the atomistic details behind the binding of B7–1 to CD28 and CTLA-4: A comprehensive protein-protein modelling study. Biochimica et Biophysica Acta (BBA). 2018; 1862 (12): 2764–2778. DOI: 10.1016/j.bbagen.2018.08.010.Wang L.X., Mei Z.Y., Zhou J.H., Yao Y.S., Li Y.H., Xu Y.H., Li J.X., Gao X.N., Zhou M.H., Jiang M.M., Gao L., Ding Y., Lu X.C. Low dose decitabine treatment induces CD80 expression in cancer cells and stimulates tumor specific cytotoxic T lymphocyte responses. PLoS One. 2013; 8 (5): е62924. DOI: 10.1371/journal.pone.0062924.Wang L.X., Mei Z.Y., Zhou J.H., Yao Y.S., Li Y.H., Xu Y.H., Li J.X., Gao X.N., Zhou M.H., Jiang M.M., Gao L., Ding Y., Lu X.C. Low dose decitabine treatment induces CD80 expression in cancer cells and stimulates tumor specific cytotoxic T lymphocyte responses. PLoS One. 2013; 8 (5): е62924. DOI: 10.1371/journal.pone.0062924.Urazova O.I., Churina E.G., Hasanova R.R., Novitskiy V.V., Poletika V.S. Association between polymorphisms of cytokine genes and secretion of IL-12p70, IL-18, and IL-27 by dendritic cells in patients with pulmonary tuberculosis. Tuberculosis. 2019; 115: 56–62. DOI: 10.1016/j.tube.2019.Urazova O.I., Churina E.G., Hasanova R.R., Novitskiy V.V., Poletika V.S. Association between polymorphisms of cytokine genes and secretion of IL-12p70, IL-18, and IL-27 by dendritic cells in patients with pulmonary tuberculosis. Tuberculosis. 2019; 115: 56–62. DOI: 10.1016/j.tube.2019.003.003.Zhuang Y., Peng H., Chen Y., Zhou S., Chen Y. Dynamic monitoring of monocyte HLA-DR expression for the diagnosis, prognosis, and prediction of sepsis. Front. Biosci. (Landmark Ed). 2017; 22: 1344–1354. DOI: 10.2741/4547.Zhuang Y., Peng H., Chen Y., Zhou S., Chen Y. Dynamic monitoring of monocyte HLA-DR expression for the diagnosis, prognosis, and prediction of sepsis. Front. Biosci. (Landmark Ed). 2017; 22: 1344–1354. DOI: 10.2741/4547.Venet F., Lukaszewicz A.C., Payen D., Hotchkiss R., Monneret G. Monitoring the immune response in sepsis: a rational approach to administration of immunoadjuvant therapies. Curr. Opin. Immunol. 2013; 25 (4): 477–483. DOI: 10.1016/j.coi.2013.05.006.Venet F., Lukaszewicz A.C., Payen D., Hotchkiss R., Monneret G. Monitoring the immune response in sepsis: a rational approach to administration of immunoadjuvant therapies. Curr. Opin. Immunol. 2013; 25 (4): 477–483. DOI: 10.1016/j.coi.2013.05.006.Monneret G.,Venet F.,Pachot A., Lepape A. Monitoring immune dysfunctions in the septic patient: a new skin for the old ceremony. Mol. Med. 2008; 14 (1-2): 64–78. DOI: 10.2119/2007-00102.Monneret G.,Venet F.,Pachot A., Lepape A. Monitoring immune dysfunctions in the septic patient: a new skin for the old ceremony. Mol. Med. 2008; 14 (1-2): 64–78. DOI: 10.2119/2007-00102.Monneret G., Lepape A.,Voirin N., Bohe J.,Venet F., Debard A.L. Persisting low monocyte human leukocyte antigen-DR expression predicts mortality in septic shock. Intensive Care Med. 2006; 32 (8): 1175–1183. DOI: 10.1007/s00134-006-0204-8.Monneret G., Lepape A.,Voirin N., Bohe J.,Venet F., Debard A.L. Persisting low monocyte human leukocyte antigen-DR expression predicts mortality in septic shock. Intensive Care Med. 2006; 32 (8): 1175–1183. DOI: 10.1007/s00134-006-0204-8.Grimaldi D., Louis S., Pène F., Sirgo G., Rousseau C., Claessens Y. E., Vimeux L., Cariou A., Mira J. P., Hosmalin A., Chiche J.D. Profound and рersistent decrease of circulating dendritic cells is associated with ICU-acquired infection in patients with septic shock intensive care. Med. 2011; 37 (9): 1438–1446. DOI: 10.1007/s00134-011-2306-1.Grimaldi D., Louis S., Pène F., Sirgo G., Rousseau C., Claessens Y. E., Vimeux L., Cariou A., Mira J. P., Hosmalin A., Chiche J.D. Profound and рersistent decrease of circulating dendritic cells is associated with ICU-acquired infection in patients with septic shock intensive care. Med. 2011; 37 (9): 1438–1446. DOI: 10.1007/s00134-011-2306-1.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.