ИЗМЕНЕНИЕ СИСТЕМЫ ГЛУТАТИОНА В КЛЕТКАХ ОПУХОЛЕВОЙ ЛИНИИ Р19 ПРИ ГИПОКСИИ

Введение. Согласно современным представлениям, опухолевый рост, наряду с формированием окислительного стресса, сопровождается гипоксией. В настоящее время актуальным является изучение регуляции функционирования молекулярных систем клеток с помощью конформационных изменений белков.

Цель исследования – оценить состояние системы глутатиона и уровень глутатионилирования бел-ков в опухолевых клетках линии Р19 при гипоксии.

Материал и методы. Материалом для исследования служили опухолевые клетки линии Р19 (тератокарцинома мыши), культивированные в условиях нормоксии и гипоксии. Методом спектрофотометрии определяли концентрацию общего, окисленного, восстановленного и белково-связанного глутатиона, величину соотношения восстановленной фракции тиола к окисленной, а также активность глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы.

Результаты. Дисбаланс системы глутатиона сопровождался снижением редокс-статуса опухолевых клеток линии Р19 в условиях гипоксии на фоне увеличения содержания белково-связанного глутатиона.

Заключение. В результате проведенного исследования установлено формирование окислительно-го стресса при моделировании гипоксии в опухолевых клетках линии Р19. Увеличение содержания белково-связанного глутатиона может свидетельствовать об участии процесса глутатионилирования протеинов в регуляции метаболизма и функций опухолевых клеток линии Р19 при гипоксии.

1. Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Глутатион ядра клетки и его функции // Биомедицинская химия. 2010. № 56 (6). С. 657–662.

2. Adimora N.J., Jones D.P., Kemp M.L. A model of redox kinetics implicates the thiol proteome in cellular hydrogen peroxide responses // Antioxid Redox Signal. 2010. № 13 (6). Р. 731–743.

3. Zhu Y., Carvey P.M., Ling Z. Altered glutathione homeosta-sis in animals prenatally exposed to lipopolysaccharide // Neurochemistry International. 2007. № 50 (4). Р. 671–680.

4. Октябрьский О.Н., Смирнова Г.В. Редокс-регуляция клеточных функций // Биохимия. 2007. № 72 (2). С. 158–174.

5. Степовая Е.А., Жаворонок Т.В., Петина Г.В. и др. Участие тиолдисульфидной системы в регуляции окислительной модификации белков в нейтрофилах при окислительном стрессе // Бюл. СО РАМН. 2010. № 30 (5). С. 64–69.

6. Kojima S., Nakayama K., Ishida H. Low dose gamma-rays activate immune functions via induction of glutathione and delay tumor growth // Journal of Radiation Research. 2004. № 45 (1). Р. 33–39.

7. Worthington D.J., Rosemeyer M.A. Glutathione reductase from human erythrocytes. Catalytic properties and aggregation // European Journal of Biochemistry. 1976. № 67. Р. 231–238.

8. Медицинские лабораторные технологии: в 2 т. / под ред. А.И. Карпищенко. CПб.: Интермедика, 1998. Т. 2. 656 с.

9. Burchill B.R., Oliver J.M., Pearson C.B. et al. Microtubule dynamics and glutathione metabolism in phagocytizing hu-man polymorphonuclear leukocytes // Journal of Cell Bio-logy. 1978. № 76 (2). Р. 439–447.

10. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Analytical Biochemistry. 1976. № 7 (1). Р. 248–254.

11. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика, 1999. 459 с.

12. Toledano M.B., Delaunay A., Monceau L., Tacnet F. Microbial H2O2 sensors as archetypical redox signaling modules // Trends in Biochemical Sciences. 2004. № 29 (7). Р. 351–357.

13. Зенков Н.К., Меньщикова Е.Б., Ткачев В.О. Некоторые принципы и механизмы редокс-регуляции // Кислород и антиоксиданты. 2009. № 1. С. 3–64.