Уровень мРНК CD16A и CD16B как потенциальный иммунологический маркер при колоректальном раке

Цель исследования – оценить уровни мРНК генов, кодирующих CD16А (FCGR3A) и CD16B (FCGR3B), в периферической крови и опухолях больных колоректальным раком (КРР).

Материалы и методы. В исследование включили 66 больных КРР, проходивших лечение в Нижегородском областном клиническом онкологическом диспансере. Группа сравнения состояла из 111 доноров крови из Нижегородского областного центра крови имени Н.Я. Климовой. Определение относительных уровней мРНК в образцах периферической крови и опухолях проводили методом обратной транскрипции – полимеразной цепной реакции в реальном времени.

Результаты. В периферической крови больных КРР уровень мРНК FCGR3A и FCGR3B был статистически значимо ниже, чем у здоровых лиц. Сниженный уровень сохранялся через 7–10 дней после операции. Нормированный уровень мРНК FCGR3A в крови и опухолях больных КРР, а также в крови здоровых доноров в несколько раз превышал уровень мРНК FCGR3В. На II стадии развития опухоли у больных КРР уровень мРНК FCGR3A и FCGR3В статистически значимо понижался, но по мере прогрессии опухоли нормализовался. Умеренная степень дифференцировки опухоли также характеризовалась падением уровня мРНК тестированных генов, при высокой степени дифференцировки наблюдалась направленность к падению. Сниженный уровень мРНК FCGR3A и FCGR3В в крови больных обнаруживался при отсутствии метастазов. В образцах опухолей мРНК FCGR3A тестировалась в 95,5% случаев, мРНК FCGR3В – 68,2%. Прогрессирование КРР сопровождалось повышением уровня мРНК FCGR3A в опухолях, уровень мРНК FCGR3В не менялся. Обнаружена положительная корреляционная связь уровня мРНК FCGR3A с уровнем мРНК TNF и FOXP3, что свидетельствует о возможной вовлеченности FCGR3A в регуляцию хронического воспаления в опухолях больных КРР.

Заключение. В крови и образцах опухолей обнаружены изменения уровня мРНК генов, кодирующих молекулы CD16A (FCGR3A) и CD16B (FCGR3A). Результаты свидетельствуют о потенциальной возможности использования данных показателей в качестве мониторинговых иммунологических маркеров при КРР.

1. Gillis C., Gouel-Cheron A., Jonsson F., Bruhns P. Contribution of human FcγRs to disease with evidence from human polymorphisms and transgenic animal studies. Front. Immunol. 2014; 5: 254. DOI: 10.3389/fimmu.2014.00254.

2. Schauer D., Starlinger P., Alidzanovic L., Zajc P., Maier T., Feldman A., Padickakudy R., Buchberger E., Elleder V., Spittler A., Stift J., Pop L., Gruenberger B., Gruenberger T., Brostjan C. Chemotherapy of colorectal liver metastases induces a rapid rise in intermediate blood monocytes which predicts treatment response. Oncoimmunology. 2016; 5 (6): e1160185. DOI: 10.1080/2162402X.2016.1160185.

3. Chomczynski P., Sacchi N. The single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction: twenty-something years on. Nature protocols. 2006; 1 (2): 581–585. DOI: 10.1038/nprot.2006.83.

4. Livak K.J., Schmittgen T.D. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2-ΔΔCT Method. Methods. 2001; 25 (4): 402–408. DOI: 10.1006/meth.2001.1262.

5. Rocca Y.S., Roberti M.P., Julia E.P., Pampena M.B., Bruno L., Rivero S., Huertas E., Sanchez Loria F., Pairola A., Caignard A., Mordoh J., Levy E.M. Phenotypic and functional dysregulated blood NK cells in colorectal cancer patients can be activated by cetuximab plus IL-2or IL- 15. Front. Immunol. 2016; 7: 413. DOI: 10.3389/fimmu.2016.00413.

6. Shaul M.E., Fridlender Z.G. Cancer related circulating and tumor-associated neutrophils – subtypes, sources and function. FEBS J. 2018 (в печати). DOI: 10.1111/febs.14524.

7. Klein S.L., Flanagan K.L. Sex differences in immune responses. Nat. Rev. Immunol. 2016; 16 (10): 626–638. DOI: 10.1038/nri.2016.90.

8. Millrud C.R., Kagedal A., Kumlien Georen S., Winqvist O., Uddman R., Razavi R., Munck-Wikland E., Cardell L.O. NET-producing CD16high CD62Ldim neutrophils migrate to tumor sites and predict improved survival in patients with HNSCC. Int. J. Cancer. 2017; 140 (11): 2557– 2567. DOI: 10.1002/ijc.30671.

9. Новиков Д.В., Фомина С.Г., Гурина Н.Н., Перенков А.Д., Красногорова Н.В., Шумилова С.В., Луковникова Л.Б., Новиков В.В., Караулов А.В. Корреляция ýкспрессии MUC1, ICAM1, IL32, FcγR3A и FoxP3 в опухолевых очагах больных раком молочной железы. Клиническая лабораторная диагностика. 2017; 62 (1): 35–39.

10. Lin Y.C., Mahalingam J., Chiang J.M., Su P.J., Chu Y.Y., Lai H.Y., Fang J.H., Huang C.T., Chiu C.T., Lin C.Y. Activated but not resting regulatory T cells accumulated in tumor microenvironment and correlated with tumor progression in patients with colorectal cancer. Int. J. Cancer. 2013; 132 (6): 1341–1350. DOI: 10.1002/ijc.27784.

11. Ganapathi S.K., Beggs A.D., Hodgson S.V., Kumar D. Expression and DNA methylation of TNF, IFNG and FOXP3 in colorectal cancer and their prognostic significance. Br. J. Cancer. 2014; 111 (8): 1581–1589. DOI: 10.1038/bjc.2014.477.