СИСТЕМА ГЛУТАТИОНА УЧАСТВУЕТ В РЕГУЛЯЦИИ АПОПТОЗА ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК

Цель исследования – выявить роль компонентов системы глутатиона в реализации рецепторного пути апоптоза опухолевых клеток линии Jurkat.

Оценку реализации апоптоза проводили методом проточной цитофлюориметрии с использованием FITS-меченного аннексина V и пропидия иодида, количества TNF R1- и Fas-презентирующих клеток; активность каспазы-3 регистрировали спектрофлюориметрическим методом. Определение содержания восстановленного и окисленного глутатиона осуществляли спектрофотометрическим методом.

Материалом для исследования служили опухолевые клетки линии Jurkat: интактные и инкубированные в присутствии селективного ингибитора ключевого фермента синтеза глутатиона – бутионин-сульфоксимина.

Исследование показало, что система глутатиона играет важную регуляторную роль в активации рецепторного пути апоптоза опухолевых клеток линии Jurkat.

Компоненты системы глутатиона являются мишенями для активации программированной гибели при опухолевом росте.

1. Меньщикова Е.Б., Зенков Н.К., Ланкин В.З. Бондарь И.А., Труфакин В.А. Окислительный стресс: Патологические состояния и заболевания. Новосибирск: АРТА, 2008. 284 с.

2. Рязанцева Н.В., Новицкий В.В., Часовских Н.Ю., Кайго-родова Е.В., Старикова Е.Г., Стариков Ю.В. Роль ре-докс-зависимых сигнальных систем в регуляции апоптоза при окислительном стрессе // Цитология. 2009. Т. 51, № 4. С. 329–334.

3. Курилова Л.С., Крутецкая З.И., Лебедев О.Е., Антонов В.Г. Влияние окисленного глутатиона и его фармакологического аналога препарата глутоксим на внутриклеточную концентрацию Са2+ в макрофагах // Цитология. 2008. Т. 50, № 5. С. 452–461.

4. Aslan M., Canatan D. Modulation of redox pathways in neu-trophils from sickle cell disease patients // Exp. Hematol. 2008. V. 36 (11). Р. 1535–1544.

5. Desideri E., Filomeni G., Ciriolo M.R. Glutathione partici-pates in the modulation of starvation-induced autophagy in carcinoma cells // Autophagy. 2012. V. 8 (12). Р. 1769–1781.

6. Октябрьский О.Н., СмирноваВ. Редокс-регуляция клеточных функций // Биохимия. 2007. Т. 72. Вып. 2. С. 158–174.

7. Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Глутатион ядра клет-ки и его функции // Биомедицинская химия. 2010. Т. 56. Вып. 6. С. 657–662.

8. Laragione T., Gianazza E., Tonelli R., Bigini P., Mennini T., Casoni F., Massignan T., Bonetto V., Ghezzi P. Regulation of redox-sensitive exofacial protein thiols in CHO cells // Biol. Chem. 2006. V. 387 (10–11). P. 1371–1376.

9. Арутюнян А.В., Дубинина Е.Е., Зыбина Н.Н. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты организма. СПб., 2000. 103 c.

10. Kojima S., Nakayama K., Ishida H. Low dose gamma-rays activate immune functions via induction of glutathione and delay tumor growth // J. Radiat. Res. 2004. V. 45, № 1. P. 33–39.

11. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quanti-tation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Analyt. Biochem. 1976. V. 7, № 1, 2. P. 248–254.

12. Cohen G.M. Caspases: the executioners of apoptosis // Biochem. J. 1997. V. 326. P. 1–16.

13. Nicholson D.W. Caspase structure, proteolytic substrates, and function during apoptotic cell death // Cell Death and Differentiation. 1999. V. 6. P. 1028–1042.

14. Зенков Н.К., Меньщикова Е.Б., Ткачев В.О. Некоторые принципы и механизмы редокс-регуляции // Кислород и антиоксиданты. 2009. Вып. 1. С. 3–64.

15. Raza H., John A., Howarth F.C. Alterations in glutathione redox metabolism, oxidative stress, and mitochondrial function in the left ventricle of elderly zucker diabetic Fatty rat heart // Int. J. Mol. Sci. 2012. V. 13 (12). P. 16241–16254.

16. Filomeni G., Rotilio G., Ciriolo M.R. Disulfide relays and phosphorylative cascades: partners in redox-mediated sig-naling pathways // Cell Death Differ. 2005. V. 12 (12). Р. 1555–1563.

17. Бурова Е.Б., Василенко К.П., Антонов В.Г., Никольский Н.Н. Трансактивация рецептора эпидермального фактора роста окисленным глутатионом и его фармакологическим аналогом Глутоксим в клетках А431 // Докл. РАН. 2005. Т. 404 (1). С. 122–124.

18. Беленичев И.Ф., Черний В.И., Колесник Ю.М. и др. Рациональная нейропротекция. Донецк: Издатель Заслав-ский А.Ю., 2009. 262 с.