Изучение роли полиморфизмов гена GCLC в прогнозировании клинического течения острого алкогольно-алиментарного панкреатита

Цель исследования: оценить роль полиморфных локусов rs12524494, rs17883901, rs606548, rs636933, rs648595, rs761142 гена GCLC в прогнозировании клинического течения острого алкогольно-алиментарного панкреатита (ОААП).

Материалы и методы. Материалом исследования послужили образцы ДНК крови, полученные от 547 пациентов с ОААП и 573 здоровых индивидов. Средний возраст больных составил 48,9 ± 13,1 года, здоровых лиц – 47,8 ± 12,1 года. Генотипирование проводилось на анализаторе MALDI-TOF MassARRAY-4. Определение в плазме крови уровня общего глутатиона проводилось с помощью набора Oxi Select™ Total Glutathione (GSSG/GSH) Assay Kit STA-312, уровня активных форм кислорода – с помощью набора OxiSelect™ InVitro ROS/RNS AssayKit (Green Fluorescence) STA-347 (Cell Biolabs Inс., США). Для определения уровня амилазы сыворотки крови применяли кинетический колориметрический метод. Статистическая обработка данных проводилась с использованием программы Statistica 10.0 и SNPStats.

Результаты. Установлено, что полиморфные варианты rs606548 (генотип C/C; отношение шансов (OR) 3,34; 95-й доверительный интервал (95% CI) 1,29–8,66; р = 0,007), rs648595 (генотип G/T; OR = 1,56; 95% CI 1,04–2,36; р = 0,029) и rs12524494 (генотип A/G; р = 0,021) гена GCLC являются предикторами повышенного риска развития панкреонекроза. Для генотипа T/T rs648595 гена GCLC (рецессивная модель) установлены наиболее низкие значения окисленного глутатиона, а генотип G/A rs17883901 GCLC ассоциировался с наиболее высокими значениями активных форм кислорода в крови. Предрасположенность к формированию перипанкреатического инфильтрата показал генотип A/A rs761142 GCLC (OR = 1,70; 95% CI 1,12–2,59; р = 0,010), а псевдокисты – аллель G rs648595 (OR = 1,47; 95% CI 1,01–2,13; р = 0,042) гена GCLC. Предрасположенность к летальному исходу вследствие развития аррозивного кровотечения ассоциирована с rs17883901 (генотип G/A; OR = 6,20; 95% CI 1,3–28,81; р = 0,031) гена GCLC.

Заключение. Установленные нами генно-фенотипические ассоциации позволят прогнозировать клиническое течение ОААП у конкретного больного с учетом его генетического статуса и своевременно определять лечебную тактику.

1. Кубышкин В.А., Затевахин И.И., Багненко С.Ф., Благовестнов Д.А., Вишневский В.А., Гальперин Э.И. Национальные клинические рекомендации по острому панкреатиту. Российское общество хирургов. Официальный сайт «Российское общество хирургов», 2019:54.

2. Lee P.J., Papachristou G.I. New insights into acute pancreatitis. Nature reviews Gastroenterology & Hepatology. 2019;16(8): 479–496. DOI: 10.1038/s41575-019-0158-2.

3. Flohé L. (ed.). Glutathione (1st ed.). CRC Press, 2018:410. DOI: 10.1201/9781351261760.

4. Cotgreave I.A., Weis M., Atzori L., Moldéus P. Glutathione and protein function. In Glutathione: Metabolism and Physiological Functions. CRC Press, 2017:155–176.

5. Bachhawat A.K., Yadav S. The glutathione cycle: Glutathione metabolism beyond the γ‐glutamyl cycle. Iubmb Life. 2018;70(7):585–592. DOI: 10.1002/iub.1756.

6. Прокопьева Н.В., Гуляева Л.Ф. Изменение активности глутатион S-трансферазы печени при остром панкреатите и применение индукторов в различные сроки заболевания. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2000;129(5):542–543. DOI: 10.1007/BF02439801.

7. Kang J.H., Chang S.Y., Jang H.J., Cho J.M., Kim D.B., Lee S.S. et al. Quercetin-induced upregulation of human GCLC gene is mediated by cis-regulatory element for early growth response protein-1 (EGR1) in INS-1 beta-cells. Journal of Cellular Biochemistry. 2009;108(6):1346–1355. DOI: 10.1002/jcb.22365.

8. Pereda J., Escobar J., Sandoval J., Rodríguez J.L., Sabater L., Pallardó F.V. et al. Glutamate cysteine ligase up-regulation fails in necrotizing pancreatitis. Free Radical Biology and Medicine. 2008;44(8):1599–1609. DOI: 10.1016/j.freeradbiomed.2008.01.018.

9. Azarova I., Klyosova E., Lazarenko V. Genetic variants in glutamate-cysteine-ligase confer protection against type 2 diabetes. Mol. Biol. 2020;47(8):5793–5805. DOI: 10.1007/s11033-020-05647-5.