Агрегация тромбоцитов в условиях «вихревого» потока in vitro у пациентов с хронической сердечной недостаточностью

Цель – сравнительное изучение влияния повышенной концентрации индукторов агрегации при пятикратном добавлении в стандартных условиях и в условиях «вихревого» потока in vitro на агрегацию тромбоцитов у пациентов с хронической сердечной недостаточностью.

Материалы и методы. В исследование включены 28 пациентов. Активность агрегации тромбоцитов в богатой тромбоцитами плазме (БТП) оценивали по кривым светопропускания (%) и среднего размера агрегатам (в относительных единицах, отн. ед.). Определение проводили с индуктором агрегации при однократном добавлении на 10-й с исследования (стандартная методика) и при пятикратном добавлении индуктора на 10-й с, 1, 2, 3 и 4-й мин исследования, при постоянном перемешивании со скоростью 800 об/мин. Эти же параметры оценивали в условиях «вихревого» потока плазмы, что достигалось изменением скорости перемешивания БТП с 800 до 0 об/мин и вновь до 800 об/мин с помощью кнопки выключения и включения центрифугирования на анализаторе.

Результаты. В ходе проведенного исследования у пациентов увеличился размер агрегатов только в условиях «вихревого» потока. При добавлении индуктора агрегации коллагена как в концентрации 2 ммоль/л, так и 10 ммоль/л показатели агрегации тромбоцитов увеличились в условиях «вихревого» потока. В ходе исследования эпинефрин-индуцированной агрегации тромбоцитов у пациентов выявили возрастание параметров агрегации, как при пятикратном добавлении индуктора, так и в условиях «вихревого» потока по сравнению со стандартной методикой.

Заключение. Предложенные нами методические подходы по созданию условий «вихревого» потока in vitro и по пятикратному добавления индуктора эпинефрина показали увеличение размеров агрегатов и степени агрегации тромбоцитов. Коллаген-индуцированная агрегация в условиях «вихревого» потока позволила выявить 7 (25%) пациентов с высокой остаточной реактивностью тромбоцитов, а эпинефрининдуцированная – 15 (54%) пациентов.

1. Гуськова Е.В., Панченко Е.П., Комаров А.Л., Добровольский А.Б., Самко А.Н. Остаточная реактивность тромбоцитов к АДФ и риск кровотечений у больных стабильной ИБС, получающих двойную антиромбоцитарную терапию в связи с плановым чрескожным коронарным вмешательством. Российский кардиологический журнал. 2015;3(119):35–42. DOI: 10.15829/1560-4071-2015-3-35-42.

2. Трубачева О.А., Суслова Т.Е., Гусакова А.М., Кологривова И.В., Шнайдер О.Л., Завадовский К.В. и др. Высокая остаточная агрегационная активность тромбоцитов у пациентов с ишемической болезнью сердца: новый методический подход к выявлению. Бюллетень сибирской медицины. 2021;20(2):113–119. DOI: 10.20538/1682-0363-2021-2-113-119.

3. Сваровская А.В., Тепляков А.Т. Инсулинорезистентность при сахарном диабете. Контроль над риском кардиоваскулярных осложнений. Томск: НИИ кардиологии, Томский НИМЦ, 2018:196.

4. Jastrzebska M., Marcinowska Z., Oledzki S. et al. Variable gender-dependent platelet responses to combined antiplatelet therapy in patients with stable coronary-artery disease. Journal of Physiology and Pharmacology. 2018;69(4):595–605. DOI: 10.26402/jpp.2018.4.10.

5. Stone G.W., Witzenbichler B., Weisz G., Rinaldi M.J., Neumann F.-J., Metzger D.C. et al. Platelet reactivity and clinical outcomes after coronary artery implantation of drug-eluting stents (ADAPT-DES): a prospective multicentre registry study. Lancet. 2013;382(9892):614–623. DOI: 10.1016/S0140-6736(13)61170-8.

6. Мирзаев К.Б., Андреев Д.А., Сычев Д.А. Оценка агрегации тромбоцитов в клинической практике. Рациональная фармакотерапия в кардиологии. 2015;11(1):85–91.

7. Трубачева О.А. и соавт. Способ определения высокой остаточной реактивности тромбоцитов у пациентов с ишемической болезнью сердца, находящихся на антиагрегантной терапии. Патент России RU № 2743808 C1.

8. Aradi D., Storey R.F., Komocsi A., Trenk D., Gulba D., Kiss R.G. et al. Expert position paper on the role of platelet function testing in patients undergoing percutaneous coronary intervention. Eur. Heart J. 2014;35(4):209–215. DOI: 10.1093/eurheartj/eht375.

9. Jastrzebska M., Marcinowska Z., Oledzki S. et al. Variable gender-dependent platelet responses to combined antiplatelet therapy in patients with stable coronary-artery disease. Journal of Рhysiology and Рharmacology. 2018;69(4):595–605. DOI: 10.26402/jpp.2018.4.10.

10. Kroll M.H., Hellums J.D., Mcintire L.V., Schafer A.I., Moake J.L. Platelets and shear stress. Blood. 1996;88(5):1525–1541.

11. Goldsmith H.L., Turitto V.T. Rheological aspects of thrombosis and haemostasis: basic principles and applications. ICTH-report–subcommittee on rheology of the international committee on thrombosis and haemostasis. Thromb. Haemost. 1986;55(3):415–435. DOI: 10.1055/s-0038-1661576.

12. Lipowsky H.H., Kovalcheck S., Zweifach B.W. The distribution of blood rheological parameters in the microvasculature of cat mesentery. Circ. Res. 1978;43(5):738–749. DOI: 10.1161/01.RES.43.5.738.

13. Basmadjian D. The effect of flow and mass transport in thrombogenesis. Ann. Biomed. Eng. 1990;18(6):685–709. DOI: 10.1007/BF02368455.

14. Gogia S., Neelamegham S. Role of fluid shear stress in regulating VWF structure, function and related blood disorders. Biorheology. 2015;52(5-6):319–335. DOI: 10.3233/BIR15061.

15. Sakariassen K.S. Thrombus formation on apex of arterial stenoses: the need for a fluid high shear stenosis diagnostic device. Fut. Cardiol. 2007;3(2):193–201. DOI: 10.2217/14796678.3.2.193.

16. Nesbitt W.S., Westein E., Tovar-Lopez F.J., Tolouei E., Mitchell A., Fu J. et al. A shear gradient-dependent platelet aggregation mechanism drives thrombus formation. Nat. Med. 2009;15(6):665–673. DOI: 10.1038/nm.1955.

17. Sakariassen K.S., Orning L., Turitto V.T. The impact of blood shear rate on arterial thrombus formation. Future Sci. OA. 2015;1(4):FSO30. DOI: 10.4155/fso.15.28.

18. Rinder C.S., Student L.A., Bonan J.L., Rinder H.M., Smith B.R. Aspirin does not inhibit adenosine diphosphate-induced platelet alpha-granule release. Blood. 1993;82(2):505–512.

19. Barstad R.M., Orvim U., Hamers M.J., Tjonnfjord G.E., Brosstad F.R., Sakariassen K.S. Reduced effect of aspirin on thrombus formation at high shear and disturbed laminar blood flow. Thromb. Haemost. 1996;75(5):827–832. DOI: 10.1055/s-0038-1650374.

20. Weiss H.J., Turitto V.T. Prostacyclin (prostaglandin I2, PGI2) inhibits platelet adhesion and thrombus formation on subendothelium. Blood. 1979;53(2):244–250.

21. Borgdorff P., Tangelder G.J., Paulus W.J. Cyclooxygenase-2 inhibitors enhance shear stress-induced platelet aggregation. J. Am. Coll. Cardiol. 2006;48(4):817–823. DOI: 10.1016/j.jacc.2006.03.053.